犬細(xì)支氣管上皮細(xì)胞；CBE1價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

犬細(xì)支氣管上皮細(xì)胞；CBE1價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

 二苯胺磺酸鋇    分子式：    633.88    分子量：     C24H20BaN2O6S2    英文名稱：    Two aniline sulfonic acid    CAS號(hào)：    6211-24-1    
 靛紅    分子式：    147.13    分子量：     C8H5NO2    英文名稱：    Isatin    CAS號(hào)：    91-56-5    
 克利西丁    分子式：    137.18    分子量：     C8H11NO；CH3OC6H3(CH3)NH    英文名稱：    Chris Shiden    CAS號(hào)：    120-71-8    
 4-硝基-7-苯并氧雜惡二唑    分子式：    249.23    分子量：     C10H11N5O3    英文名稱：    4- nitro -7- piperazine benzo oxa evil two triazole    CAS號(hào)：    139332-66-4    
 異丙硫醇    分子式：    76.16    分子量：     C3H8S    英文名稱：    ISO - C    CAS號(hào)：    75-33-2    
 叔丁基硫    分子式：    146.29    分子量：     C8H18S    英文名稱：    Tert butyl sulfide    CAS號(hào)：    107-47-1    
 丁二酸    分子式：    118.09    分子量：     C4H6O4    英文名稱：    Succinate    CAS號(hào)：    110-15-6    
 嘧啶肟草    分子式：    609.59    分子量：     C32H27N5O8    英文名稱：    Ether of the    CAS號(hào)：    168088-61-7    
 克菌丹    分子式：    330.6    分子量：     C9H8NSO2Cl3    英文名稱：    Captan    CAS號(hào)：    133-06-2    
 醋酸潑尼松    分子式：    400.46    分子量：     C23H28O6    英文名稱：    Prednisone acetate    CAS號(hào)：    125-10-0 
低載量 PCR 片段純化試劑盒    90211-100    100 次
100 次    雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒    
200mL    大鼠粒細(xì)胞分離液 1.119    
0.1mL×10    DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞    
1mL    抗凝血酶Ⅲ，10mg/mL    
EcoRI    17-0050    2000U
DAB 法生物素雜交試劑盒    131214-5    5次
100μg     Tth RecA 蛋白    
50 次    端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒 (TRAP)    
5次    PCR 法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒     
10U    ATP 硫酸化酶    
細(xì)種屬鑒定及分型    D026-1    1 個(gè)樣
T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒    91108A-50    50 次
1g    維生素 D3    
100mL    福林酚試劑    
5g    8- 羥基喹啉硫    
100mL    酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基    
加拿大樹(shù)膠    CAS8007-47-4    100mL
去垢劑去除樹(shù)脂    131050-10    10mL
10 次    柱式探針純化試劑盒    
5g    玫瑰紅鹽    
1g    氨芐青干粉    
1.5mL    非酶 RNA 清除劑 1.0    
1mL    Y2HGold 酵母種