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小鼠雜交瘤細胞;c7b8F10圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱小鼠雜交瘤細胞;c7b8F10圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
[AsAbelisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[AsAb試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
[APAelisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[APA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
[ANGAelisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[ANGA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
[AhRelisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[AhR試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
[ADAM9elisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[ADAM9試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
[8-iso-PGF2αelisa試劑盒]規格型號:96T/48T關鍵詞:[8-iso-PGF2α試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人CD30分子試劑盒規格型號:96T/48T人CD30分子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人CD30分子試劑盒、人CD30分子elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
豬可溶性P選擇試劑盒規格型號:96T/48T豬可溶性P選擇試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬可溶性P選擇試劑盒、豬可溶性P選擇elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠白三B4試劑盒規格型號:96T/48T大鼠白三B4試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠白三B4試劑盒、大鼠白三B4 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。1mL 超快轉染試劑盒
PLPD 固定液 131290-250 250 mL
Oligo(dT) 再生溶液 130976-100 100mL
10x0.1mL 凝膠法內毒素半定量試劑盒
1mL AD494(DE3) 菌種
100mg MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )
100 次 即用型易錯 PCR 試劑盒
MM4-64(FM®4-64) 22-0480-1 1mg
微型離心管研磨杵 ( 有離心管 ) 80603B-50 50 套
48 T 羥脯氨酸測試盒( 堿水解法 )( 測動物血清、組織、尿液 )
1套 玻璃勻漿器 ,10mL
50 次 植物 RNAout
200U ATP 依賴的 DNase
人粒細胞分離液 1.113 120908-200 200mL
中提柱式 BAC DNAout 90608-5 5次
200mL 人白細胞分離液 1.078
10g 次(亞)甲基蘭
50 次 細菌 DNAout
200mL 小鼠 NK 細胞分離液 1.076
堿性磷酸酶測試劑盒 18-0410-48 48 T
DNA 上樣液 ( 紅 ),6× 3690A-10 10mL
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