小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞；1G5圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞；1G5圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

MeCP2  甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
AE2/SLC4A2  陰離子交換蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml
MRC1/CD206  巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 0.2ml
Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體規(guī)格: 0.1ml
FGF14  成纖維細(xì)胞生因子14抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-SYN1(Ser62+Ser67)  磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
laminin  層粘連蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
DHFRL1  二氫葉酸還原酶樣1抗體規(guī)格: 0.2ml
ERG25  甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體 0.2ml
KRAS  原基因K-ras抗體規(guī)格: 0.1ml
ZNF828/C13orf8  鋅指蛋白828抗體規(guī)格: 0.2ml
14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon)  14-3-3蛋白抗體 0.1ml
IRS P53  胰島素受體底物p53蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
ENTHD1/Epsin2B  Epsin2B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗人IgG規(guī)格: 0.1ml
IL1RAPL1  白介素1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
p150 CAF1  染色質(zhì)組裝因子1P155抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
IGC  非洲爪蟾IGC抗體規(guī)格: 1ml
BCL7B  BCL7B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgM規(guī)格: 0.1ml
HPV16-E6  人類狀瘤病毒16抗體規(guī)格: 0.1ml32 次        終點(diǎn)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒
10 塊        LB 平板培養(yǎng)基 (Amp 抗性 )
100mg        膠原酶Ⅳ型
20 次        細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-PE）
鏈脲佐菌素    100mg    CAS18883-66-4
蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (43.0-200.0KD)    10 次    70102C-10
250mg        α- 環(huán)狀糊精
100g        氯化鋰 ( 無水 )
25g        組蛋白
48 T        琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒
多酚氧化酶 ( 菌菇 )    25KU    CAS9002-10-2
玻璃勻漿器 ,10mL    1套    101103D-1
柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒    50 次    101119-5
1mg        NS-398(COX-2 抑制劑 )
5g        6- 羥基多巴胺
1mg        BCECF AM
20L        長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)
Calcein M     100mg    22-0110-100
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 盒裝 )    96 支    17-016-96
25mg        嘌呤干粉
100mL        白細(xì)胞裂解液
10mg        Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 )