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雜交瘤細胞株;FABP 4C2圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;FABP 4C2圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgM規格: 0.1ml
HSP71 熱休克蛋白71抗體規格: 0.1ml
CDX1 尾側型同源轉錄因子1抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗馬IgG規格: 0.1ml
ACY 3/HCV-HCBP1 丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體規格: 0.2ml
TRPM3 瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體(M亞家族)規格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Gold 膠體金標記的兔抗狗IgG規格: 0.5ml
phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體規格: 0.1ml
Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗牛IgG 規格: 0.1ml
BARD1 腺易感基因環狀結構域蛋白抗體規格: 0.1ml
hnRNP M/CEAR 異質性核糖核蛋白M抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗大鼠IgG規格: 0.1ml
GAP43 神經生相關蛋白43規格: 0.1ml
GFRAL 膠質細胞系源性神經營養因子受體α1樣蛋白抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/FITC FITC標記的小鼠抗人IgG規格: 0.3ml
Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3規格: 0.1ml
HDHD1 HDHD1蛋白抗體規格: 0.2ml總谷胱甘肽檢測試劑盒 100 次 18-0730-100
SSPE 溶液 ,20× 100mL 100809-100
0.1mL×10 TG1 化學感受態細胞
100mL 非凍型組織 DNA 保存液
5mg 胃蛋白酶抑制劑
100 次 植物種屬鑒定 PCR Mix 2
聚乙烯吡咯烷酮 40000 100g CAS9003-39-8
Western 印跡膜洗膜液 250mL 81211-250
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 ) 3000U 130699-3000
5g 牛血清白蛋白
250mg Calcein Blue
100mL 非凍型血液 DNA 保存液
100mL 茜素紅 S 染色試劑盒
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 ) 100 T 18-0620-100
溴化乙錠干粉 (EB) 1g 100808-1
100 次 神經氨酸酶檢測試劑盒
100 次 DNA 快速連接試劑盒
500 次 BCA 法蛋白定量試劑盒
1套 克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫構建試劑盒
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶 80U 130645-80
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