甲磺酸伊馬替尼耐藥的胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞系；GIST-1114圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 甲磺酸伊馬替尼耐藥的胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞系；GIST-1114圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

DNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
柱式真菌 RNAout50 次
柱式海洋動(dòng)物 DNAout50 次
120312-500末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶 (TdT)500U
90603B-5隨機(jī)引物法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒5次
T4 噬菌體基因 32 蛋白500μg 
蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3.3-20.1KD)15 次
離心管 ( 配研磨杵用 ) 50 只
小鼠抗 VSV-G 標(biāo)簽單抗100μL
120708-1000凝血酶1000U
131141-100dNTP 和引物清除劑100 次
透明質(zhì)酸酶100mg
F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
肌球蛋白100mg大鼠白三烯B5(LTB5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
 鵝血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
豬黃嘌呤氧化酶（XOD）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
植物維生素D(VD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠葉酸(FA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠肝脂酶(HL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
Red-Tth DNA 聚合酶250U
CAS130-22-3茜素紅 S25g
131130F-100真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次
細(xì)菌 DNAout250 次
高載量 PCR 片段純化試劑盒100 次
D- 棉子糖10g