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皮膚鱗癌細胞;A-431圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 皮膚鱗癌細胞;A-431圖片
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的85歲女性,是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內可成瘤,在瓊脂上培養可形成克隆;是一個超三倍體人細胞株。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C148
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
皮膚鱗癌細胞;A-431圖片細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
皮膚鱗癌細胞;A-431圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
皮膚鱗癌細胞;A-431圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
熒光增白劑 281g
菌落 PCR 試劑盒 2.050 次
黃嘌呤1g
CTP 溶液,2.5mM2mL
CAS9008-97-3植物血球凝集素 P5mg
131080-1重組蛋白 G1mg
柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次
Long-Taq DNA 聚合酶500U
木瓜蛋白酶5g
Caspase 2 檢測試劑盒50 次
CAS298-93-1噻唑蘭250mg
100811-10質譜兼容型蛋白銀染試劑盒10 次
β- 半乳糖苷酶檢測試劑盒300 次
M15 感受態細胞0.1 mL×10
傘形酮5g
乳酸脫氫酶測試盒24 T
兔抗 His 標簽多抗,HRP 標記100μL
131283-250 多聚甲醛 - 氫氧化固定液250 mL
71001-50柱式病毒 RNAout50 次人抗肝素PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人角化細胞生長因子(KGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人T細胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人c-fos ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
皮膚鱗癌細胞;A-431圖片犬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
猴子瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
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