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人急性淋巴細胞白血病細胞;CEM/C1價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人急性淋巴細胞白血病細胞;CEM/C1價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 淋巴母細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 CEM/C1是人T細胞白血病細胞株CCRF-CEM(見ATCC CCL-119)具有喜樹堿抗性的衍生株。 1991年細胞株選擇并亞克隆了對CPT的抗性。 細胞表現出對CPT類似物水溶性的托泊替康和非水溶性的9-氨基-CPT及10,11-亞甲二氧基-CPT具有交叉抗性。 CEM/C1細胞對CPT的敏感性較母系CEM細胞低31倍。 CEM/C1細胞表現非典型的多藥抗性和轉換拓補異構酶I催化活性。 對CPT的抗性維持6個月以上。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
120631-100Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL
JM105 菌種1mL
琥珀酸脫氫酶測試盒48 T
18-0060-50GSH—PX 測試盒50 T
無機焦磷酸酶,熱穩定250U
赤250mg
氯化鋰 ( 無水 )100g
cDNA *鏈合成試劑盒10 次
CAS1397-89-3可溶性兩性 B25mg
中草藥 DNAout20 次
Bst DNA 聚合酶,大片段800U
AEBSF 溶液,10mg/mL5mL
130681-0.83通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol
130957-100免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次
3671-50血液 DNAout50 次
低 pH 緩沖液套裝30 次
生物素化蛋白 A1mg
140599-100山羊抗兔 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記100 μL
Southern 真菌 DNAout10 次
8- 氮雜鳥嘌呤1Vial
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )5mg
0.5 mL RNase-free 離心管1000 支Diethyl azodicarboxylate偶氮二酸二乙酯1972-28-7
2',7'-DICHLOROFLUORESCIN DIACETATE2′7′-二熒光素二乙酸2044-85-1
Cyclohexylamine hydrochloride環己胺酸4998-76-9
SODIUM METHACRYLATE基丙酸5536-61-8
4-Methoxybenzylchloride4-氧基芐824-94-2
Sesamol芝麻酚533-31-3
CHLORO(DIMETHYL)PHOSPHINE(二基)膦811-62-1
FLUCYTHRINATE菊酯70124-77-5
4-Acetoxybenzoic acid4-乙酰氧基酸2345-34-8
Indirubin靛玉紅479-41-4
Sodium tetrachloroaurate (III) dihydrate金酸13874-02-7
2,2'-(Phenylimino)diethanolN-基二乙醇胺120-07-0
Adriamycin阿霉素23214-92-8
Sodium chlorite亞酸7758-19-2
N-METHYL-N-PHENYLCARBAMOYL CHLORIDEN-基-N-基氨基酰4285-42-1
PALLADIUM(II) TRIFLUOROACETATE三乙酸鈀(II)42196-31-6
L-BUTHIONINE-(S,R)-SULFOXIMINE丁硫氨酸-亞砜亞胺83730-53-4
β-hydroxynorleucineβ-羥基正亮氨酸
18-0480-24醛縮酶測試盒24 T
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