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人乳腺導管瘤細胞;BT-474價格質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人乳腺導管瘤細胞;BT-474價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態特性 上皮樣;圓形、成團
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系由Lasfargues E和 Coutinho WG建立,源于一名60歲患有浸潤性乳腺導管癌的白人女性的實體瘤。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 新生牛血清,10%;10ug/ml 人重組insulin
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:13,18;D21S11:28,32.2;D3S1358:17;D5S818:11,13;D7S820:9,12;D8S1179:10,12;FGA:22,25;PentaD:9,14;PentaE:5;TH01:7;TPOX:8;vWA:15,16
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
乳酸脫氫酶測試盒24 T
碘硝基四唑紫嘌呤250mg
ABTS 溶液,7mM 50mL
100806-100Earle 溶液100mL
SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 )25mg
鹽酸萬古霉素100mg
DNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )100g
CAS9002-13-5脲酶 ( 尿素酶 巨豆 )20Ku
18-0590-48維生素 C 測試盒48 T
纖維蛋白原100mg
丁酰膽堿酯酶500U
血液保存和 DNA 純化套裝100 次大鼠骨骼肌細胞*培養基100mL
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒規格:500次gersion
BT-20(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
UBA培養基/UBA Medium啤酒中厭氧菌檢測250克國產/進口
衛矛醇半固體瓊脂/Dulcitol Semisolid Agar細菌衛矛醇發酵試驗10克國產/進口
S-180(小鼠肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細胞英文名稱:H22
人肺腺細胞(胸膜滲出液)英文名稱:Calu-3
T/G HA-VSMC(人血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
吳茱萸堿規格:1g/支;98%
枸櫞酸鹽培養基/檸檬酸鹽培養基/Citrate Agar大腸桿菌和產氣桿菌的鑒別250克國產/進口
SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
EAC(小鼠艾氏腹水細胞)5×106cells/瓶×2
人胰島β細胞*培養基100mL
非洲綠猴SV40 轉化的腎細胞英文名稱:COS-7
QGY-7701, 人肝細胞gersion
GoldCassette-HIS/HIS重組標簽蛋白快速檢測試劑盒(精裝)2次2次、10次
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測食品中沙門氏菌250克國產/進口
SK-MES-1(人肺鱗細胞)5×106cells/瓶×2
SW626(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
LLC-WRC 256(大鼠腹水細胞)5×106cells/瓶×2
293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
130808-1顯影粉1袋
甲基纖維素25g
非酶多糖清除劑 (DNA )50 次
C43(DE3) 菌種1mL
小鼠抗 S1 標簽單抗100μL
60208-10硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g
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