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Cas9穩定表達的人宮頸癌細胞;Hela-Cas9-529價格

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌ATCC

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-07 10:10:34瀏覽次數:371次

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Cas9穩定表達的人宮頸癌細胞;Hela-Cas9-529價格售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

Cas9穩定表達的人宮頸癌細胞;Hela-Cas9-529價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

Cas9穩定表達的人宮頸癌細胞;Hela-Cas9-529價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使Hela細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:9,10;D12S391:20,25;D13S317:13.3,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16,16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17,17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D6S1043:18,18;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:18,21;Penta E:7,17;TH01:7,7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

核酸外切酶 T250U
CAS1214-39-76- 芐基氨基嘌呤1g
12-96LBA4404 農桿菌菌種1mL
一管式點突變試劑盒10 次
可保種型藍白 T 載體50ng
羧甲基纖維素鹽25g
F12 培養基100mL
柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
130821-100阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑100 次
70503R-50DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)50 次
生物素標記的 Oligo(dT)5μg
電泳過硫酸銨0.1gx10
apo- 轉鐵蛋白10mg
HRP 標記的抗生物素抗體10μL
CAS7558-79-4磷酸氫二500g
12-259Turbo 菌種1mL
一步式廣譜 DNAout10mL2,3-HEPTANEDIONE2,3-庚烷二1996/4/8
Tetrabutylammonium fluoride四丁基化銨429-41-4
2-(1-Piperazinyl)pyrimidine2-嗪嘧啶20980-22-7
Z-LEU-OH DCHAZ-L-亮氨酸DCHA53363-87-4
N-OCTADECYLTRICHLOROSILANE十八烷基三硅烷112-04-9
CALYCOSIN 7-O-GLUCOSIDE毛蕊異黃苷20633-67-4
Isosilybin異水飛薊賓72581-71-6
D-fructose 6-(dihydrogen phosphate)果糖-6-磷酸643-13-0
Styrene oxide氧化乙1996/9/3
Citraconic anhydride檸康酐616-02-4
ASTRAGALOSIDE I黃芪皂苷 I84680-75-1
Dextran葡聚糖9004-54-0
POLYETHYLENE, CHLORINATED化聚乙63231-66-3
Triisopentylamine三異胺645-41-0
SODIUM 2-HYDROXYBUTYRATE2-羥基丁酸5094-24-6
3,5-Dichlorophenol3,5-二酚591-35-5
NA酚紫
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL
甘油100mL
動物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次
CAS144-48-9碘代乙酰胺5g
130891-50動物線粒體總蛋白提取劑盒50 次

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