人肝癌細(xì)胞；Hep3b價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

人肝癌細(xì)胞；Hep3b價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  Hep-3b細(xì)胞建系于1979年，源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細(xì)胞產(chǎn)生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體（C3)、C3活性載體，纖維原等，具有廣泛的研究?jī)r(jià)值。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:4～1:6傳代，每周換液2次
傳代情況 C2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：8；D13S317：12，14；D16S539：10；D18S51：20；D19S433：12.2，14；D21S11：30，31；D2S1338：21，25；D3S1358：15，OL；D5S818：13；D7S820：8，10；D8S1179：12；FGA：18；TH01：6，7；TPOX：9；vWA：17；
同工酶 
染色體  60～82
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

T7 核酸內(nèi)切酶 I250U
CAS58-85-5D- 生物素 ( 維生素 H)1g
12-267GS190 酵母菌種1mL
一管式植物 DNAout500 次
可溶性兩性霉素 B25mg
葡聚糖 T-50010g
HAT 篩選培養(yǎng)基500mL
尼龍膜，13×20cm1張
140634-500MTS 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500 次
70503Z-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)50 次
生物素化的堿性磷酸酶 (AP)1mg
淀粉樣 β- 蛋白片段 25-35250μg
丙酮酸25g
NP-40 裂解液100mL
CAS5989-81-1α- 乳糖100g
130543-25α2巨球蛋白25Inh.U
柱式分枝桿菌 RNAout50 次
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL
Aminoally-dUTP 溶液，10mM100μLDL-2-AMINOOCTANOIC ACID2-氨基酸2187/7/7
4-N-OCTYLOXYBENZALDEHYDE4-氧基24083-13-4
N-Methyl pyrrole1-基吡咯96-54-8
N-Acetylsulfanilyl chloride對(duì)乙酰胺基磺酰121-60-8
Trityl azide疊氮化三基烷14309-25-2
3-METHYLCYCLOHEXANONE3-基環(huán)己591-24-2
6-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE6-羧基熒光素二乙酸酯3348/3/6
4-ACETAMIDOCYCLOHEXANOL4-乙酰氨基環(huán)己醇23363-88-4
4-Hydroxyquinoline4-羥基喹啉611-36-9
METHYL 4-HYDROXY-3-IODOBENZOATE4-羥基-3-碘酸酯15126-06-4
2-ACETYLCYCLOHEXANONE2-乙酰基環(huán)己874-23-7
SILVER DIETHYLDITHIOCARBAMATE砷試劑1470-61-7
1,3-Dichloro-2-propa,3-二丙醇96-23-1
5-Hydroxyindole5-羥基吲哚1953-54-4
6-Methyl-1-indanone6-基-1-茚24623-20-9
2-Benzothiazolol2-羥基并噻唑934-34-9
Boc-D-aspartic acid 4-benzyl ester叔丁氧羰基-D-天冬氨酸 4-芐酯51186-58-4
2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediolmono(2-methylpropanoate)2,2,4-三基-1,3-二醇單異丁酸酯25265-77-4
2,3-Dichlorothiophene-5-sulfonamide2,3-二噻吩-5-磺酰胺256353-34-1
Southernwood Oil蒿油
benzoylmesaconine酰新烏頭原63238-67-5
O-[2-ACETAMIDO-2-DEOXY-D-GLUCOPYRANOSYLI(1Z)-2-(乙酰基氨基)-2-脫氧-N-[[(基氨基)羰基]氧基]-D-葡萄糖酸肟 DELTA-內(nèi)酯132489-69-1
p-Toluenethiol對(duì)硫酚106-45-6