熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞；U2OS-Luc teT-on圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞；U2OS-Luc teT-on圖片
形態特性  上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  表達熒光素酶，帶四環素開關。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%Tet system 提供的胎牛血清；200 μg/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代，每周2次換液。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12，13；D13S317：13；D16S539：11，12；D18S51：12，14；D19S433：15；D21S11：31；D2S1338：20，24；D3S1358：16，OL；D5S818：8，11；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：20；TH01：6，9.3；TPOX：11，12；vWA：14，18；
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

小鼠抗 Flag 標簽單抗1000μL
130651-100DNA 促旋酶 (E.coli)100U
51208A-0.5 dNTP 溶液，2.5mM0.5mL
天門冬酰胺酶250U
ER2566 菌種1mL
Hanks 溶液100mL
鏈霉親和素，HRP 標記0.1mL
CAS79-06-1丙烯酰胺100g
131129C-100植物種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
XTT 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒500 次
肝素瓊脂糖50mL
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二1g
柱式昆蟲 mtDNAout，測序10 次
CAS28166-41-8α- 氰基 -4- 羥基肉桂酸10g
12-229C600 菌種1mL
血液線粒體和核 DNA 雙提試劑盒 25 次
紅細胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL
對硝基苯磷酸二鹽1g
磷酸蛋白染色試劑盒10 次
CAS111-30-8戊二醛，25% 水溶液10mL
130899-100GAL 指示劑培養基100mL
胰蛋白酶，質譜100μgBOC-[15N]GLY-OHBOC-GLY-OH-15N106665-75-2
Tri-n-octylamine三胺1116-76-3
Cremophor EL聚氧乙蓖麻油EL61791-12-6
4-Fluoro-5-methoxy-2-methyl-1H-indole2-基-4--5-氧基-1H-吲哚288385-93-3
1-Hydroxy-7-azabenzotriazoleN-羥基-7-氮雜并三氮唑39968-33-7
N-Cbz-L-PhenylalanineN-芐氧羰基-L-丙氨酸1161-13-3
Tributyl borate酸三丁酯688-74-4
3-Aminopropyl-methyl-diethoxysilaneγ-氨丙基基二乙氧基硅烷3179-76-8
Bromo hydrazine溴化肼
3,5-Dinitro-2-methylbenzoic acid2-基-3,5-二基酸28169-46-2
3-(Dimethyl-octylazaniumyl)propane-1-sulfonate硫代甜菜 815178-76-4
Carrageenan卡拉膠11114-20-8
Lithium acetate dihydrate乙酸鋰,二水6108-17-4
Ethyl hydrogen malonate丙二酸單乙酯1071-46-1
Pseudoginsenoside RT5擬人參皂甙 RT598474-78-3
Ciclopirox環吡胺29342-05-0
Brilliant Green Lactose Bile Broth煌綠乳糖膽肉湯
1-Chloro-2-iodobenzene鄰碘615-41-8