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人T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E圖片
形態特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 具有四環素開關可控誘導外源基因的表達。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
人肺腺細胞(胸膜滲出液)英文名稱:Calu-3
緩沖蛋白胨水/緩沖蛋白胨水增菌液/BPW沙門氏菌前增菌培養和李氏菌前增菌培養250克國產/進口
彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
牛膽鹽/Bile salt from oxBR,60%25克國產/進口
大鼠肺動脈成纖維細胞*培養基100mL
細菌總數顯色培養基配套平皿/Total Genes Chromogenic Medium Dish9㎝/塊國產/進口
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
PA317(小鼠成纖維細胞)5×106cells/瓶×2gersion
MKN-28(人胃高轉移細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-468(人腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
MDA-MB-453(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
HIC(人小腸細胞)5×106cells/瓶×2
A673(人橫紋肌瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CRFK(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠內臟脂肪細胞*培養基100mL4-Fluoro-7-nitrobenzofurazan4--7-基-2,1,3-并氧雜惡二唑29270-56-2
Benzamidine hydrochloride芐脒酸1670-14-0
3-DODECYLTHIOPHENE3-十二烷基噻吩104934-52-3
Bromopentafluorobenzene溴五344-04-7
Cryptochlorogenic acid隱綠原酸905-99-7
1 2 4-TRIMETHYLPYRAZOLIUM METHYLSULFATE1,2,4-三基吡唑硫酸乙酯856614-13-6
3,3'-Dimethylbenzidine dihydrochloride酸鄰聯胺612-82-8
1,6-Dibromohexane1,6-二溴己烷629-03-8
4-Amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide5--2,4-二磺酰胺基胺121-30-2
9,10-Diphenylanthracene9,10-二基蒽1499-10-1
N-ACRYLOXYSUCCINIMIDEN-丙酰氧基琥珀酰亞胺38862-24-7
NA化卵黃瓊脂
MALONIC ACID DISODIUM SALT丙二酸141-95-7
Aluminum nitrate酸鋁13473-90-0
Alginic acid海藻酸9005-32-7
TRIFLUOROMETHANESULFONIMIDE雙三基磺酰亞胺82113-65-3
Methyl 5-chloropyrazine-2-carboxylate5-吡嗪-2-羧酸酯33332-25-1
A549/DDP, 人肺腺耐藥細胞株
食管鱗英文名稱:KYSE150
5%糖發酵管/5% Lactose Ferment Broth糖遲發酵菌種的鑒別250克國產/進口
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