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液相色譜法基線波動和基線漂移的問題總結(jié)
閱讀：16986 發(fā)布時間：2017-3-151.液相系統(tǒng)沒有平衡好，柱子里的流動相一直在變化，在檢測器里面的吸收就會一直變化，導(dǎo)致基線波動的發(fā)生；梯度時如果其實比例的流動相平衡時間過短也會造成基線波動；
2.實驗室環(huán)境不穩(wěn)定（比如溫度忽高忽低，氣流不斷變化等），這對于沒有柱溫箱或只有單向溫度變化的HPLC儀器的影響尤其明顯；即使有比較好的柱溫箱時，也要注意別讓空調(diào)的出風(fēng)口一直對照儀器吹，那樣基線也可能會波動；此外實驗室有電磁干擾時，也有可能會導(dǎo)致此問題的發(fā)生；
3.檢測器的流通池被污染，造成吸收的不恒定，此時需要清洗流通池；
4.檢測器燈能量不足時，吸收會變得不穩(wěn)定，這時基線一般也不穩(wěn)定，特別是在低波長處尤為明顯；
5.當使用低波長檢測時，有時流動相會使用兩相或以上的等度，這時混合器的很小的混合比例的誤差都會被放大，很有可能會使基線發(fā)生波動，這時將流動相按比例混合到一個通道里時，一般都會使情況改善很多；
6.流動相里的有機相的截止波長要大于檢測波長20nm以上，這一點切記，比如甲醇的截止波長是210nm，乙腈是190nm。當使用230nm以下的檢測波長時，如果條件允許，使用乙腈，可以避免基線波動，其余類推；
7.儀器出現(xiàn)問題也會造成基線波動，比如(1)流動相過濾頭堵塞、入口主動閥濾芯污染、單向閥被污染物堵塞、泵頭有氣泡、比例閥出故障、系統(tǒng)流路漏液，比如管路裂開、peek接頭沒*連上色譜柱而導(dǎo)致的泄露等；
8.沒有脫氣機的儀器，當流動相未脫氣或脫氣未*時，基線也會波動；有脫氣機的每次使用前都要檢查一下是否正常工作；
9.當大家使用梯度作為組分洗脫方式的時候，有條件的使用超純水，磷酸鹽、三乙胺等固體液體加入試劑也使用HPLC級別的，因為在梯度中隨著有機相（洗脫力較強）的不斷增加，流動相系統(tǒng)里的雜質(zhì)會在基線上反映出來，導(dǎo)致出現(xiàn)鬼峰或基線波動；
10.流動相中的有機相和緩沖液的比例一定要注意調(diào)配好，緩沖液的比例不能過大，要不然會出現(xiàn)緩沖鹽在柱子里析出的情況，這樣不但會造成基線波動的發(fā)生，甚至?xí)斐缮V柱毀壞；
11.當色譜柱被污染時，也會造成基線波動，這里尤其要注意的是大家在做合成中控實驗的時候，不要用合成的原始反應(yīng)液直接進樣，因為原液里面有很多非極性或極性很小的化合物，一旦進入到反相色譜柱里和非極性的C18發(fā)生相互作用，很可能就洗脫不下來使色譜柱變性或者慢慢的被洗脫下來，造成以后的分析出現(xiàn)不穩(wěn)定的鬼峰或者基線波動；
12.一些比較老的液相儀對電壓要求很高，電壓有點起伏檢測器就會反映教明顯，比如老的惠普和島津等儀器，這時需要配一個穩(wěn)壓電源來解決此問題；此外儀器和電腦之間連接的數(shù)據(jù)線出問題或老化也可能會使基線波動。