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液相色譜柱的使用與維護之色譜柱使用注意事項
一般使用注意事項
色譜柱的劇烈震動可能導致柱床斷層,因此使用過程中需要避免強烈撞擊、摔打,需輕拿輕放。
不同類型色譜柱耐壓能力不同,請在規定的壓力范圍內使用。
流動相pH不要超過色譜柱pH使用范圍,特別是堿性較高的流動相條件對色譜柱傷害較大,同時流動相條件不要頻繁發生大幅度變化,否則會導致色譜柱更容易劣化。
大曹三耀常見色譜柱pH使用范圍:
C18 MG 系列柱 pH2-10
C18 AQ 系列柱 pH2-9
C18 ACR 系列柱 pH1-10
C18 BB 系列柱 pH1-11
SCX柱 pH2-7
NH2柱 pH2-8
PC HILIC柱 pH3-7.5
為防止由異物進入導致的色譜柱入口處過濾篩板堵塞,建議使用線上過濾器或預柱。
復雜基質樣品有可能導致色譜柱的突然性堵塞或壽命減短,因此樣品需經過充分前處理,可能情況下高速離心并過濾。
色譜柱一般使用柱溫為20-45℃,更高柱溫條件方法可以應用,但一般情況下柱溫越高,色譜柱越易劣化。
更換流動相時請注意流動相之間的互溶情況,不要發生鹽析。
通常情況下,正相條件需要充分過渡,要避免儀器中殘留超純水的干擾。
實驗完畢后,停止流動相供液,在泵壓力指示降為0后再進行色譜柱的安裝和拆卸,以免壓力急劇變化導致色譜柱損壞。
非C18系列色譜柱使用注意事項
1. 離子交換型色譜柱
1.1 一般使用注意事項同上
1.2 離子交換分析流動相一般為含鹽水溶液或和有機溶劑的混合體系,新SCX柱、NH2柱均使用純乙腈封存,直接使用流動相置換會導致鹽析,因此必須經過水-有機相體系過渡后,才可使用流動相。
1.3 離子交換型色譜柱不可用超純水沖洗或過渡,但可使用含有離子的水系流動相。
1.4 新色譜柱初次使用平衡時間長,SCX、NH2柱使用含緩沖鹽流動相時,推薦使用流動相小流速平衡過夜。
2. HILIC型色譜柱
2.1 一般使用注意事項同上
2.2 HILIC型色譜柱通常在70%以上乙腈條件下使用,乙腈比例過低會導致色譜柱壽命減短。
2.3 NH2色譜柱在HILIC模式分析下分析糖類物質,流動相不得添加緩沖鹽。
2.4 新色譜柱初次使用平衡時間較長,一般需要2-4h流動相平衡。