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磁珠在核酸提取過程中是如何工作的?

時間:2024/12/2閱讀:127
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生物磁珠通常是表面帶有特定化學功能基團的具有細小粒徑的超順磁微球,通常用于生物醫學研究和臨床診斷中的樣本處理。這些磁珠的設計目的是為了在磁場中能夠迅速聚集,而在沒有磁場的情況下又能均勻分散,這種特性使得它們非常適合用于生物分子(如蛋白質、核酸等)的分離和純化。

硅羥基核酸提取磁珠結構圖 

硅羥基核酸提取磁珠結構圖

磁珠在核酸提取過程中的工作原理主要包括以下幾個步驟。

一、裂解

在核酸提取的初期階段,樣本(如血液、組織、細胞等)會被加入到含有裂解液的反應體系中。裂解液含有強力的蛋白質變性劑,能夠破壞細胞或病毒的結構,使核酸從細胞或病毒顆粒中釋放出來。

二、結合

核酸被釋放后,磁珠被加入到反應混合物中。這些功能基團在一定的鹽濃度和其他條件(如pH值)下,可以與核酸(DNA或RNA)通過靜電作用、疏水作用和氫鍵等方式結合。這樣,核酸就被吸附到了磁珠的表面。

三、洗滌

利用磁珠的磁性,通過外加磁場可以將吸附了核酸的磁珠從液體中分離出來。接著,通過洗滌步驟去除未結合的蛋白質、酶以及其他雜質。對于不同樣本中,可能含有不同類型的污染物,去除特定不同類型的污染物需要選擇不同類型的洗滌液。

四、洗脫

最后一步是洗脫,通過改變條件(如降低鹽濃度或改變pH值),可以使核酸從磁珠表面釋放。洗脫液通常是適合核酸溶解的緩沖液,如TE緩沖液或純水。這樣,就能獲得純化的核酸,供進一步的分子生物學分析使用。

磁珠法核酸提取的優點在于其高效性、可控性和自動化潛力,它不僅可以減少人工操作帶來的誤差,還能確保核酸提取的質量,并且適用于各種樣本類型和大規模自動化處理。

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