熒光酶標儀一般是由光學系統、單色器系統、樣品室、探測器和檢測系統構成,簡單來說,光源發射的光束通過單色器系統處理后穿過整個樣品,部分的未被樣品吸收的光抵達光電檢測器當中,經過信號處理后,反饋在儀器顯示屏上。
基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,并牢固地結合形成仍保持活性的免疫復合物。
熒光酶標儀測定是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。隨著檢測方式的發展,擁有多種檢測模式的熒光酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發光(Lum)。
熒光酶標儀的核心是由全光譜光學分光系統和9通道光學快速測量模塊組成。準確率高,技術先進,操作簡單,分析精確,儀器使用覆蓋面廣。廣泛適用于科研單位,食品安全檢測領域,高等教育學院實驗室,醫療檢驗,農業畜牧系統實驗室。該儀器的檢測速度是指其完成比色測定所需要的時間,在快速讀取模式下,整板讀取僅需10秒。檢測速度快,有利于提高檢測的精密度,可有效避免由于測定過程中,因測定時間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。
在使用熒光酶標儀的時候,我們應該注意這些方面:
一、外觀
酶標儀上應有儀器名稱,型號,編號,生產廠家,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關均能正常工作,外表面無明顯機械損傷;顯示文字應清楚完整。
二、酶標儀的穩定性漂移、
選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測量標稱值為1.0A的光譜中性濾光片測量操作按儀器說明進行、,記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測量值之差不應超過±0.00。
三、吸光度測量的準確度
選用405,492和620nm波長,以空氣為參比,分別測量標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標板,按儀器說明連續測量3次,按下式計算準確度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:為標準值。
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