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薄層層析板是用高純度薄層層析硅膠(粉狀)調入一定量的粘結劑噴制成,板面純白、平整均勻、細密。主要成分為SiO2·nH2O,化學性質穩定,除強堿和強酸外,不與其他酸堿反應。薄層層析板可直接用于多種類型有機物質的定性或定量分析。
薄層層析板可以適合絕大多數的物質。Merck的正相硅膠板采用Silica 60為原材料,通過*的聚合技術使薄層板的表面堅硬且光滑的表面使得薄層層析板擁有*的分離效果。
在制備薄層層析板時大部分靠的是經驗,要關注液體往下流的速度,在操作時候要均勻薄厚一致的鋪在載玻片上,然后舀一勺倒在載玻片中間使其慢慢布滿整塊板面,之后再用手輕輕鎮動幾下,記住一定不要有氣泡。
薄層層析板就是我們通常所說的硅膠板,要了解制作與操作方法必須先知道其原理;
薄層層析法是一種微量而快速的分析方法,操作容易,設備要求低,但對于每一種被分離的物質都需要各自獨立的方法,TLC主要應用于氨基酸、多肽、糖脂、核苷酸和生物堿類多種物質的分離和鑒定。
1.樣品的溶解:將薄層層析板樣品溶于展開劑極性相近、揮發性高的有機溶劑。
2.點樣:控制上樣量,點樣基線距底邊2.0 cm,控制樣點直徑(5 mm)及點間距離(1-1.5 cm),避免因擴散而影響檢測(下圖),點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展層:展層容器必須密封,提前加入展開溶劑,使溶劑蒸氣達到平衡。展開劑不能高于上樣點,否則,無法求得Rf值和準確判斷粗產物中各組分在薄層板上的相對位置。
4. 薄層層析板展開劑的選擇條件:有良好的溶解性、使待分離組分間分開、待測組分的Rf值在0.2~0.8之間、不與待測組分或吸附劑發生化學反應、沸點適中,黏度較小、展開后組分斑點圓且集中、混合溶劑zui好用新鮮配制。
5. 邊緣效應:邊緣效應是樣品在層析時,薄層板兩邊的斑點比中間斑點移動快,并向兩邊偏斜。其原因是用混合溶劑展開時,極性較弱和沸點較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發,使薄層板上的展開劑比例不一,而出現邊緣效應,解決邊緣效應zui有效的方法是剪去薄層板浸入展開劑一端的兩角。
薄層層析板的用途:在醫藥、農藥、中草藥、有機化工產品及糧食、食品的微量雜質及主要成份的鑒定中已得到普遍應用。
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