注射級聚山梨酯80Ⅱ藥典備案檢測方法

[9005-65-6]

　　本品系植物來源油酸山梨坦和環氧乙烷聚合而成的聚氧乙烯20油酸山梨坦。

　　【性狀】本品為無色至微黃色黏稠液體。

　　本品在水、乙醇、甲醇或乙酸乙酯中易溶，在礦物油中極微溶解。

　　相對密度　本品的相對密度（通則0601）為1.06～1.09。

　　黏度　本品的運動黏度（通則0633第一法），在25℃時（毛細管內徑為2.0～2.5mm）為350～450mm2/s。

　　酸值　取本品10g，精密稱定，置250ml錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）50ml，使溶解，附回流冷凝器煮沸10分鐘，放冷，加酚酞指示液5滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，酸值（通則0713）不得過1.0。

　　羥值　本品的羥值（通則0713）為65～80。

　　碘值　本品的碘值（通則0713）為18～24。

　　過氧化值　本品的過氧化值（通則0713）不得過3。

　　皂化值　本品的皂化值（通則0713）為45～55。

　　【鑒別】（1）取本品的水溶液（l→20）5ml，加氫氧化鈉試液5ml，煮沸數分鐘，放冷，用稀鹽酸酸化，顯乳白色渾濁。

　　（2）取本品的水溶液（1→20），滴加溴試液，溴試液即褪色。

　　（3）取本品6ml，加水4ml混勻，呈膠狀物。

　　（4）取本品的水溶液（1→20）10ml，加硫氰酸鈷銨溶液（取硫氰酸銨17.4g與硝酸鈷2.8g，加水溶解成100ml）5ml，混勻，再加5ml，振搖混合，靜置后，層顯藍色。

　　【檢查】酸堿度　取本品約0.50g，加水10ml溶解后，依法測定（通則0631），pH值應為5.0～7.5。

　　吸光度　取本品0.1g，精密稱定。置25ml量瓶中，加乙腈-水（70:30）混合液適量，使溶解，繼續加乙腈-水（70:30）混合液至刻度。照紫外-可見分光光度法（通則0401），掃描范圍190～400nm。在225nm波長處吸光度不得過1.0，在267nm波長處吸光度不得過0.10且不得出現最大吸收峰。

　　顏色　取本品10ml，與同體積的黃色2號標準液比較（通則0901），不得更深。

　　乙二醇、二甘醇和三甘醇　取本品4g，精密稱定，置100ml量瓶中，精密加入內標溶液（取1，3-丁二醇適量，用無水乙醇稀釋制成每1ml中約含4mg的溶液）1.0ml，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取乙二醇、二甘醇和三甘醇對照品適量，精密稱定，加無水乙醇稀釋配制成每1ml含乙二醇、二甘醇、三甘醇各4mg的溶液，作為對照品貯備液；精密量取對照品貯備液1.0ml與內標溶液1.0ml，置100ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取對照品溶液1.0ml，置10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為靈敏度溶液。照氣相色譜法（通則0521）試驗。以50%苯基-50%甲基聚硅氧烷為固定液（30m×0.53mm，1.0μm），起始溫度為40℃，以每分鐘10℃的速率升溫至60℃，維持5分鐘后，以每分鐘5℃的速率升溫至110℃，維持5分鐘，再以每分鐘5℃的速率升溫至170℃，維持5分鐘，再以每分鐘35℃的速率升溫至280℃，維持30分鐘（根據樣品殘留情況可調整時間）。進樣口溫度為270℃，氫火焰離子化檢測器溫度為290℃。精密量取靈敏度溶液1μl，進樣，調節檢測靈敏度使乙二醇、二甘醇和三甘醇峰的信噪比均大于10；另精密量取供試品溶液與對照品溶液各1μl，分別進樣，記錄色譜圖。按內標法以峰面積計算，乙二醇、二甘醇和三甘醇均不得過0.01%。

　　環氧乙烷和二氧六環　取本品約lg，精密稱定，置頂空瓶中，精密加水1.0ml，密封，搖勻，作為供試品溶液。精密量取環氧乙烷水溶液對照品適量，用水稀釋制成每1ml中約含2μg的溶液，作為環氧乙烷對照品溶液。另取二氧六環對照品適量，精密稱定，用水制成每1ml中約含20μg的溶液，作為二氧六環對照品溶液。取本品lg，精密稱定，置頂空瓶中，精密加環氧乙烷對照品溶液與二氧六環對照品溶液各0.5ml，密封，搖勻，作為對照溶液。精密量取環氧乙烷對照品溶液及二氧六環對照品溶液各0.5ml置頂空瓶中，加新配制的0.001%乙醛溶液0.1ml，密封，搖勻，作為系統適用性試驗（靈敏度）溶液。照氣相色譜法（通則0521）試驗，以聚二甲基硅氧烷為固定液，起始溫度為35℃，維持5分鐘，以每分鐘5℃的速率升溫至180℃，然后以每分鐘30℃的速率升溫至230℃，維持5分鐘（根據分離情況調整時間）。進樣口溫度為150℃，氫火焰離子化檢測器溫度為250℃，頂空平衡溫度為70℃，平衡時間45分鐘。取系統適用性試驗（靈敏度）溶液頂空進樣，調節檢測靈敏度使環氧乙烷和二氧六環峰的信噪比均大于10，乙醛峰和環氧乙烷峰的分離度不小于2.0。分別取供試品溶液及對照溶液頂空進樣，重復進樣至少3次。環氧乙烷峰面積的相對標準偏差應不得過15%，二氧六環峰面積的相對標準偏差應不得過10%。按標準加入法計算，含環氧乙烷不得過0.0001%，含二氧六環不得過0.001%。

　　凍結試驗　取本品，置玻璃容器內，于冰浴中放置24小時，不得凍結。

　　水分　取本品，照水分測定法（通則0832第一法1）測定，含水分不得過0.5%。

　　熾灼殘渣　取本品1.0g，依法檢查（通則0841），遺留殘渣不得過0.1%。

　　重金屬　取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之十。

　　砷鹽　取本品1.0g，置凱氏燒瓶中，加硫酸5ml，用小火消化使炭化，控制溫度不超過120℃（必要時可添加硫酸，總量不超過10ml），小心逐滴加入濃過氧化氫溶液，俟反應停止，繼續加熱，并滴加濃過氧化氫溶液至溶液無色，冷卻，加水10ml，蒸發至濃煙發生使除盡過氧化氫，加鹽酸5ml與水適量，依法檢查（通則0822第一法），應符合規定（不得過0.0002%）。

　　脂肪酸組成　取本品0.1g，精密稱定，置50ml錐形瓶中，加2%氫氧化鈉甲醇溶液2ml，置65℃水浴中加熱回流30分鐘，放冷，加14%甲醇溶液2ml，再在水浴中加熱回流30分鐘，放冷，加正庚烷4ml，繼續在水浴中加熱回流5分鐘，放冷，加飽和氯化鈉溶液10ml，振搖，靜置使分層，取上層液，用水洗滌3次，每次4ml，上層液經無水硫酸鈉干燥后，作為供試品溶液。照氣相色譜法（通則0521）試驗。以88%氰丙基聚硅氧烷為固定液的石英毛細管柱（100m×0.25mm，0.20μm）為色譜柱，起始溫度為90℃，以每分鐘20℃的速率升溫至160℃，維持1分鐘，再以每分鐘2℃的速率升溫至220℃，維持20分鐘；進樣口溫度為340℃；氫火焰離子化檢測器溫度為330℃。分別取肉豆蔻酸甲酯、棕櫚酸甲酯、棕櫚油酸甲酯、硬脂酸甲酯、亞油酸甲酯、亞麻酸甲酯以及油酸甲酯對照品適量，加正庚烷溶解并制成每1ml中各含0.1mg的溶液，取1μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，理論板數按油酸甲酯峰計算不低于10000，各色譜峰的分離度應符合要求。取供試品溶液1μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按面積歸一化法計算（峰面積小于0.05%的峰可忽略不計），含油酸應不低于98.0%，含肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、亞油酸與亞麻酸均不得過0.5%。

　　細菌內毒素　取本品，依法檢查（通則1143），每lmg聚山梨酯80中含內毒素的量應小于0.012EU。

　　【類別】藥用輔料，增溶劑、乳化劑和蛋白穩定劑等。

注射級聚山梨酯80Ⅱ藥典備案檢測方法