組織甘油檢測(cè)生化試劑盒介紹：

甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成，是血脂的主要成分，也是機(jī)體重要的供能物質(zhì)。高甘油三酯是常見(jiàn)的高脂血癥，與許多疾病相關(guān)。與血漿甘油三酯測(cè)定相比，實(shí)體組織和細(xì)胞的甘油三酯測(cè)定并非易事。本試劑盒避免了有毒的仿甲醇提取、繁雜的氮?dú)獯蹈珊椭|(zhì)復(fù)溶等步驟，采用高效能試劑進(jìn)行組織細(xì)胞裂解和甘油三酯抽提，而且優(yōu)化了GPO Trinder酶學(xué)反應(yīng)組分和操作步驟。簡(jiǎn)單易行、靈敏度高檢測(cè)范圍為20-2000µmol/L。可用于精確測(cè)量動(dòng)植物組織細(xì)胞、固態(tài)食品材料、高濃度油料樣品中的甘油三酯含量。

原理：

（1）脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油；

（2）甘油激酶將甘油磷酸化為3-磷酸甘油；

（3）3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫；在過(guò)氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺，其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍：適用于動(dòng)物實(shí)體組織、培養(yǎng)細(xì)胞、油料植物組織、固態(tài)食品組織、高濃度油料樣品中甘油三酯含量的測(cè)定。

操作步驟：

組織細(xì)胞裂解：

在裂解前，組織或者細(xì)胞用PBS洗滌兩次以去除甘油。

1. 原代脂肪細(xì)胞：200g，5分鐘離心收集細(xì)胞。建議每100µl壓積（Packed Cell Volume）脂肪細(xì)胞加入1ml裂解液，震蕩裂解，而后室溫靜置10分鐘。

2. 分化脂肪細(xì)胞或非脂肪細(xì)胞：可先用酶消化、離心收集細(xì)胞而后進(jìn)行裂解，也可直接在培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行裂解。通常情況下，可按比例每1x106個(gè)細(xì)胞加入0.1ml裂解液，混勻后室溫靜置10分鐘。

3. 動(dòng)物組織：離心管精確稱(chēng)重，加入組織塊后再稱(chēng)重，二者相減(即減量稱(chēng)重法)計(jì)算組織重量(約50mg)。強(qiáng)烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。強(qiáng)烈建議裂解液用量在1ml左右，保證有效的勻漿裂解與脂質(zhì)提取。用電動(dòng)高速勻漿器或手動(dòng)玻璃勻漿器破碎組織。（不超聲方法，因其不能和均勻破碎。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整初始的組織細(xì)胞加入量），勻漿后靜置10分鐘。

4. 植物油料種子、食品、含高油量樣品：用減量稱(chēng)重法對(duì)樣品進(jìn)行精確稱(chēng)重，建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。加入裂解液后可用研缽對(duì)樣品進(jìn)行研磨，而后將研磨液轉(zhuǎn)移到新的離心管中，室溫靜置10分鐘。

組織甘油檢測(cè)生化試劑盒所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于食用，醫(yī)療等其它用途。