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微量蛋白加樣緩沖液(1/6×)通常用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)等蛋白質分析實驗中,以幫助蛋白質樣品更好地與凝膠結合并在電泳過程中保持穩定。以下是對微量蛋白加樣緩沖液(1/6×)的詳細解析:
一、產品特性
濃度:1/6×表示該緩沖液是常規濃度(通常指6×)的六分之一。這種低濃度設計通常用于需要精確控制樣品體積和濃度的場合。
主要成分:微量蛋白加樣緩沖液通常包含SDS(十二烷基硫酸鈉)、緩沖鹽溶液、溴酚藍指示劑等成分。SDS能夠與蛋白質結合,形成帶負電荷的復合物,從而消除蛋白質間的電荷差異;溴酚藍則作為指示劑,用于觀察蛋白質的遷移情況。
用途:主要用于SDS-PAGE電泳中蛋白質樣品的上樣。它可以幫助蛋白質樣品更好地溶解、變性和與凝膠結合,從而提高電泳的分辨率和準確性。
二、使用注意事項
溶解與混勻:在使用前,應確保微量蛋白加樣緩沖液完-全溶解并混勻。如有必要,可以輕輕搖動容器以促進溶解。
樣品處理:將適量的蛋白質樣品與緩沖液混合,通常按照一定比例進行(如每50微升蛋白樣品加入一定量的1/6×緩沖液)。混合后,應進行加熱變性處理(如100℃水浴加熱5-10分鐘),以使蛋白質充分變性并釋放出SDS。
上樣與電泳:冷卻至室溫后,離心去除可能的沉淀物,取上清液進行上樣。電泳過程中,應注意控制電壓和時間,以確保蛋白質能夠充分遷移至凝膠的末端。
三、儲存與有效期
儲存條件:微量蛋白加樣緩沖液通常應在-20℃下保存,以避免變質和降解。在儲存過程中,應確保容器密封良好,以防止水分揮發和污染。
有效期:根據生產商的說明,微量蛋白加樣緩沖液的有效期通常為12個月。然而,具體有效期可能因儲存條件、產品批次等因素而有所不同。因此,在使用前應檢查產品的有效期標簽,并在有效期內使用。
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