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人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測方法開發(fā)

時間:2017-3-10閱讀:1250
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人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測方法開發(fā)

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質(zhì)的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子,還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴張,從而導(dǎo)致血壓降低。

 

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質(zhì)的激肽基團衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子,還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴張,從而導(dǎo)致血壓降低。

人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測方法開發(fā)

因此,對這種激素肽的變化進行高靈敏度、高選擇性和高準(zhǔn)確度地定量,并將其作為疾病進展或藥物治療的評估指標(biāo),將會極為有利。盡管以往都是通過配體結(jié)合試驗(LBAs)對生物制劑進行定量分析,但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已成為一種趨勢。這在某種程度上是因為LBAs產(chǎn)生顯著的交叉反應(yīng)問題并且缺乏標(biāo)準(zhǔn)化。

LC-MS/MS具有多種優(yōu)勢,例如開發(fā)時間更短、準(zhǔn)確度和精度更高、可重復(fù)進樣,并且容易區(qū)分相似度很高的類似物、代謝物或內(nèi)源性干擾物。常見的肽通常難以通過LC-MS/MS進行分析,這是因為其不易離子化以及不易產(chǎn)生理想的碎片離子而導(dǎo)致MS靈敏度較低,從而使得LC和樣品制備方法開發(fā)非常困難。由于緩激肽在血漿中的濃度低至pg/mL水平且代謝速度快,在采血和樣品制備過程中還可通過蛋白水解人為生成,因此對其進行準(zhǔn)確定量相當(dāng)困難。

本研究采用了專門設(shè)計的血液收集技術(shù)以防止體外緩激肽的形成,并且利用混合型固相萃取(SPE)和實心核顆粒色譜柱,zui大限度降低并消除基質(zhì)干擾的同時提高定量分析的靈敏度。

人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測方法開發(fā)

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ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。

培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。

血清:胎牛血清,人血清,動物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。

生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標(biāo)準(zhǔn)品.

抗體:一抗,二抗,流式抗體等。

放免試劑盒:進口放免試劑盒,國產(chǎn)放免試劑盒,進口美國鳳凰等放免試劑盒。

實驗室代測服務(wù):放免代測,WB實驗,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,病理細胞染色代測,生化實驗代測等。

 

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