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細(xì)胞污染鑒定
一、肉眼觀察以下幾項(xiàng)：
1. 細(xì)胞瓶身：
如果瓶身上沒(méi)有裂縫，正常；如果瓶身上有裂縫，則污染幾率非常大。
2. 培養(yǎng)基顏色：
如果培養(yǎng)基顏色是紅色或者粉色，正常；如果是橙色，則可能是污染或者細(xì)胞過(guò)密；如果是黃色，則污染幾率非常大。
3. 培養(yǎng)基澄清度：
如果培養(yǎng)基澄清，正常；如果有少許漂浮物，則可能是污染或者有細(xì)胞凋亡；如果培養(yǎng)基很渾濁，甚至出現(xiàn)絮狀物，則污染幾率非常大。
二、進(jìn)行顯微鏡下觀察（通常觀察前需先靜置細(xì)胞1-2h）
顯微鏡下可以清晰觀察到細(xì)胞是否有菌類(lèi)污染，菌類(lèi)污染通常分為桿菌、球菌和霉菌，為了方便大家分辨，我特地找了之前收到有典型污染的細(xì)胞照片，希望能幫助大家判斷。
1. 桿菌
常見(jiàn)的有大腸桿菌，長(zhǎng)度通常在2-5um左右。
2. 球菌
常見(jiàn)的有葡萄球菌，直徑通常在1-2um左右。
3. 霉菌
常見(jiàn)的有毛霉，菌絲寬2-10um左右，長(zhǎng)度短則幾十um，長(zhǎng)則可達(dá)幾mm。
需要提醒的是，因?yàn)檫\(yùn)輸過(guò)程中細(xì)胞離開(kāi)了其正常生長(zhǎng)所需要的環(huán)境，部分細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)凋亡或產(chǎn)生細(xì)胞碎片，容易誤認(rèn)為是細(xì)菌污染；另外培養(yǎng)基中的雜質(zhì)纖維也容易誤認(rèn)為是霉菌污染，具體區(qū)分方法如下：
1.細(xì)胞碎片和桿菌
細(xì)胞碎片只會(huì)隨著細(xì)胞狀態(tài)的變差而變多，通常增長(zhǎng)不快；桿菌則增殖非常快，以常見(jiàn)的大腸桿菌為例，常溫25℃增殖1倍需要40min左右（此數(shù)據(jù)可查閱相關(guān)文獻(xiàn)驗(yàn)證），培養(yǎng)基很快變黃且渾濁。
2.凋亡細(xì)胞和球菌
凋亡細(xì)胞通常只比正常細(xì)胞小一點(diǎn)，只會(huì)隨著細(xì)胞狀態(tài)的變差而變多，通常增長(zhǎng)不快；球菌則要小很多，且成串或成團(tuán)，培養(yǎng)基很快變黃且渾濁。
3.雜質(zhì)纖維和霉菌
雜質(zhì)纖維通常是過(guò)濾時(shí)殘留的濾紙纖維，或者是酒精棉球上的棉纖維，在不開(kāi)瓶處理的情況下其數(shù)量不會(huì)增長(zhǎng)；霉菌的話雖然增殖速度沒(méi)有桿菌和球菌快，但還是會(huì)有明顯增殖。