導  語

截至目前，已累計約500萬人次感染新型冠狀病毒。在當前新型冠狀病毒肆虐的大背景下，新疫苗、新治療藥物由于需經過較長周期的臨床試驗以確保其安全性，無法迅速應用于臨床；因此，老藥新用不免為一種積極嘗試，硫酸羥氯喹（Hydroxychlorquine sulfate，CAS#：747-36-4）即是其中一種。

硫酸羥氯喹于1955年在美國上市，目前已在加拿大、法國、德國、澳大利亞、中國、日本等70多個國家獲得批準。初硫酸羥氯喹被用于治療瘧疾，后來臨床發現此藥物具有輕度免疫抑制和免疫調節的作用。自新冠肺炎疫情在擴散以來，有部分臨床研究報道硫酸羥氯喹對于新型冠狀病毒感染患者有效；此外,美國總統特朗普在多個*場合親自“帶貨”，更是引發了美國、印度、巴西、新加坡等國對于硫酸羥氯喹的熱潮。

（圖片來源于網絡）

為了規范用藥、減少用藥安全問題，美國FDA于3月28號發布了硫酸羥氯喹用于治療COVID-19住院患者的緊急使用授權，并在4月14日發布了硫酸羥氯喹的BE指南。

盡管目前仍無確鑿研究表明硫酸羥氯喹可以對抗新冠病毒，但世界各國對硫酸羥氯喹及其原料藥（API）的關注度已逐漸升溫。印度是硫酸羥氯喹大的生產國之一，約占供應量的一半。此前印度已經批準該藥用于預防新冠病毒感染，目前已經向*上百個國家出口了8000多萬片硫酸羥氯喹。隨著印度近期將該藥列入禁止出口原料藥名單的事件發酵，硫酸羥氯喹及相關原料供貨價格已瘋漲。硫酸羥氯喹生產國的產能及出口規模在短期內呈現出爆發增長；有消息報道，自3月20日以來，國內某制藥廠商生產的硫酸羥氯喹，5天內已出口原料藥4.9噸。

為了應對預期增長的藥品質量控制及臨床藥物濃度監測需求，本文遵照EP10.0（歐洲藥典）、USP43（美國藥典），開發了硫酸羥氯喹有關物質、硫酸羥氯喹片含量測定的HPLC（以及UHPLC）方法；此外參考FDA關于生物樣品分析指導原則及硫酸羥氯喹BE指南，開發了LCMS-8050監測人血漿中硫酸羥氯喹含量的測定方法。

1. EP方法測試硫酸羥氯喹有關物質（使用超高效液相色譜系統LC-30A或同等型號）

EP10.0中要求雜質C與硫酸羥氯喹、雜質B與雜質C分離度均需≥3.0。

圖1. 硫酸羥氯喹有關物質色譜圖

結果顯示，雜質C與硫酸羥氯喹、雜質B與雜質C分離度*要求。

2. USP方法測試硫酸羥氯喹片含量（使用高效液相色譜系統LC-2040C 3D或同等型號）

圖2. 硫酸羥氯喹與磷酸氯喹標準樣品色譜圖

結果表明硫酸羥氯喹與磷酸氯喹分離度為3.728，*要求。

3. LCMS-8050測定人血漿中硫酸羥氯喹含量

人血漿樣品經乙腈沉淀蛋白后離心取上清進樣分析，硫酸羥氯喹在0.5~500 ng/mL范圍內線性良好，相關系數大于0.998；方法定量限為0.5 ng/mL；硫酸羥氯喹低、中、高濃度樣品日內精密度在1.57~8.33 %之間；準確度在97.91~106.02 %之間；硫酸羥氯喹低、中、高濃度樣品及內標的基質效應在98.31~108.17 %之間；使用LCMS-8050三重四極桿液質聯用系統可在10 min內對血漿中硫酸羥氯喹含量進行測定。

圖3. 空白血漿及含硫酸羥氯喹血漿樣品（200 ng/mL）    圖4. 空白血漿及含磷酸氯喹血漿樣品（100 ng/mL）

LC-2030/2040 series                                   LC-40

LCMS-8050

采用島津液相色譜系統，依照EP10.0方法及USP43方法，可以很好的對硫酸羥氯喹原料藥及其制劑質量控制的要求；在硫酸羥氯喹需求激增的背景下，保證藥品質量。在此基礎上開發的LCMS-8050監測人血漿中的硫酸羥氯喹含量，則是為了進一步結合臨床指標，準確評價硫酸羥氯喹在人體內的藥效及相互作用，指導更加合理、安全用藥。無論結果如何，候選藥物在質量控制及臨床試驗等高質量研究中的表現都值得被了解和不斷完善。我們將繼續關注更多科學證據的揭曉；同時更期冀在創新科技力量的推動下，新冠病毒能早日被有效遏制。