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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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染色質免疫共沉淀技術（ChIP）
染色質免疫共沉淀技術（ChIP）能真實、完整地反映結合在DNA序列上的調控蛋白，是目前確定與特定蛋白結合的基因組區(qū)域或確定與特定基因組區(qū)域結合的蛋白質的一種很好的方法。采用結合微陣列技術在染色體基因表達調控區(qū)域檢查染色體活性，是深入分析癌癥、心血管疾病以及*神經系統(tǒng)紊亂等疾病的主要代謝通路的一種非常有效的工具。
染色質免疫共沉淀CHIP：真核生物的基因組DNA以染色質的形式存在，研究蛋白質與DNA在染色質環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達機制的基本途徑。與傳統(tǒng)的EMSA技術相比，染色質免疫沉淀技術（CHIP）能真實完整地反映結合在DNA序列上的調控蛋白，是目前研究體內DNA與蛋白質相互作用的佳方法。
基本原理是在活細胞狀態(tài)下以甲醛固定蛋白質－DNA復合物，超聲將其隨機切斷為長度范圍內的染色質小片段，然后加入目的蛋白抗體，通過抗體沉淀靶蛋白-DNA復合物，通過洗脫的方法得到富集的靶蛋白-DNA復合物，特異性地富集目的蛋白結合的DNA的片段，通過對目的片斷的純化與檢測（PCR分析），從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。
該技術主要應用于：1.組蛋白修飾研究 2.轉錄調控分析 3.藥物開發(fā)研究 4.有絲分裂研究 5.DNA損傷與凋亡分析。
染色質免疫共沉淀CHIP基本步驟：
1）甲醛處理細胞
2）收集細胞，超聲破碎
3）加入目的蛋白的抗體，與靶蛋白-DNA復合物相互結合
4）加入ProteinA，結合抗體-靶蛋白-DNA復合物，沉淀
5)對沉淀下來的復合物進行清洗，除去一些非特異性結合
6)洗脫，得到富集的靶蛋白-DNA復合物
7)解交聯(lián)，純化富集的DNA的片斷
8)PCR或基因芯片分析。
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