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目錄:上海一研生物科技有限公司>>抗體>>單克隆抗體>> ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗體

ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗體
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IgG

     

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研究領域

細胞生物  信號轉導  轉運蛋白

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一抗

 


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一、 免疫動物選擇

根據需要產生目標抗原的免疫反應,選擇合適的免疫動物。例如,小鼠是免疫動物之一,因其易于操作且在免疫應答方面較為強大。

二、抗原免疫

將目標抗原注射到免疫動物體內,通常需要多次免疫以激發免疫反應。可以選擇不同的免疫路線,如皮下、腹腔、靜脈等。

三 、細胞融合

從免疫動物獲得脾細胞或淋巴細胞,與骨髓瘤細胞或其他癌細胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成雜交瘤細胞。融合細胞通常使用(PEG)或電穿孔等方法促進細胞融合。

四、 雜交瘤細胞篩選

對融合細胞進行篩選,一般使用HAT選擇性培養基,通過對非雜交瘤細胞和單克隆雜交瘤細胞的抗代選擇,篩選出產生目標抗體的單克隆雜交瘤細胞。

五、 單克隆抗體生產

從篩選出的單克隆雜交瘤細胞中獲取單一細胞系,并進行大規模培養和產生抗體。一般可采用體外或體內方式生產單克隆抗體。

六、抗體純化

通過不同的方法對產生的單克隆抗體進行純化,去除雜質,例如使用蛋白A/G層析、蛋白L層析、蛋白G層析等。

七、 鑒定和驗證

對純化后的單克隆抗體進行鑒定和驗證,例如使用酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、免疫印跡(Western blotting)等方法,確定其免疫特異性和活性。

八、應用

將制備好的單克隆抗體應用于具體的研究、診斷或治療等領域,例如免疫組化、流式細胞術、免疫疫治療等。


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一抗可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默病和帕金森病的生物標志物。二抗則主要用于檢測和純化抗原蛋白。

二抗在標記和檢測方面比較靈敏和靈活。所以,它們在流式細胞術、蛋白質印跡和細胞成像等一系列應用中用于一抗的比色、化學發光和熒光檢測。二抗類型的選擇基于一抗的類別:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、標簽類型和來源宿主。

由于大多數一抗是使用少數宿主物種開發的,并且大多數一抗屬于 IgG 類,因此制造商通常提供可用于許多不同檢測程序和系統的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗雞 IgG 或抗山羊 IgG。所選擇的二抗應始終能夠識別產生一抗的宿主物種,例如,為了檢測從小鼠產生的一抗,使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白質印跡中,標記通常是化學發光、比色或基于熒光的,但在流式細胞術和免疫熒光中,僅使用熒光標記。




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