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詳細介紹
BINKIT® NK細胞擴增套裝（外周血單核細胞來源）
◆原理
BINKIT® 可從外周血單核細胞擴增高活性的自然殺傷（NK）細胞。
◆優點?特色
●無需飼養層細胞，即可從外周血細胞 (PBMCs)中擴增NK細胞
●3周時間內NK細胞的數目可擴增幾百到幾千倍
●NK細胞將獲得增強的細胞殺傷性
●該試劑盒適合20~50 mL的外周血細胞
●Xeno-free（不含動物來源的材料）
◆案例?應用
<試劑盒組成>
●NK 細胞初始培養基
●NK細胞初始培養瓶
●NK細胞傳代培養基
●BINKIT® 明細表(PDF格式)
<未提供材料>
●Ficoll 淋巴細胞分層液（GE Healthcare）
●無菌PBS
●FBS或自體血漿（56℃加熱30分鐘以滅活）
<結果>
圖 1 使用BINKIT® 進行體外NK細胞擴增
利用BINKIT® 對外周血單核細胞進行NK細胞擴增，CD3-CD56+細胞從15.8％增加到88.6％。
圖 2 使用BINKIT® 進行體外NK細胞擴增
利用BINKIT® 對外周血單核細胞（來自健康自愿者，HD, n=3）進行NK細胞擴增。
細胞計數（左）和倍率的變化（右）表明NK細胞體在外高效擴增。
圖3 使用BINKIT® 進行體外NK細胞擴增
分別以BINKIT擴增的NK細胞（實線）和從3名志愿者新鮮分離的NK細胞（虛線）來檢測NK細胞對K562細胞的殺傷性。
結果表明，擴增后的NK細胞對K562細胞殺傷性顯著增強（P<0.01）。
<培養步驟>
(1) 準備試劑
在NK細胞初始培養基和NK細胞傳代培養基中，加入5% (v/v) 的熱滅活FBS或自體血漿。
(2) 制備外周血單核細胞（PBMCs）
通過Ficoll密度梯度離心，從人全血中分離外周血單核細胞。
(3)清洗NK細胞初始培養瓶
加入10 mLPBS至NK細胞初始培養瓶。傾斜培養瓶使PBS覆蓋整個表面。
將培養瓶中液體全部倒出，小心以免刮傷培養瓶的表面。重復洗滌過程兩次。
(4)從PBMCs中培養NK細胞
將1×106 cells/mL 的PBMCs 懸浮于NK細胞初始培養基中。每1 mL 細胞懸浮液加入40 μL的NK細胞初始混合物。
細胞懸液轉移至預洗滌的NK細胞初始培養瓶，在37℃，5％的CO2培養3天。
(5)更換培養基及傳代
同貼壁細胞處理一樣，轉移時置于錐形離心管，200×g離心8分鐘。
去除上清，將1×106 cells/mL 的NK細胞懸浮于傳代培養基中，培養基內加入5 mL
轉移后的懸浮細胞置于常規培養瓶中，在37℃，5％ CO2條件下培養。
每2-3天將 0.8×106 cells/mL 細胞置于*NK細胞傳代培養基中，進行傳代培養。
<建議培養期>
2-3 周
注意：試劑僅供科研使用，不可用于臨床。
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 |
| BIJ-N501-1 | BINKITNK細胞增殖套裝（外周血單核細胞來源） | 1 kit |
| BIJ-N501-2 | BINKITNK細胞增殖套裝（外周血單核細胞來源 | 2 kits |
| BIJ-N501-4 | BINKITNK細胞增殖套裝（外周血單核細胞來源 | 4 kits |
| BIJ-N501-8 | BINKITNK細胞增殖套裝（外周血單核細胞來源 | 8 kits |
BINKIT® NK細胞擴增套裝（外周血單核細胞來源）