V8蛋白酶
別名：Endoproteinase Glu C，Staphylococcal Protease Protease V8
CAS NO：66676-43-5
EC NO：3.4.21.19
分子量：約27000
外觀：白色的結晶或結晶性粉末

V8蛋白酶

 

 

別名：Endoproteinase Glu C，Staphylococcal Protease Protease V8

CAS NO：66676-43-5

EC NO：3.4.21.19

分子量：約27000

外觀：白色的結晶或結晶性粉末

 

 

◆摘要

 

    （蛋白質工程學試劑）（氨基酸序列分析試劑）（序列分析酶）

      在溫和條件下進行蛋白多肽鏈的切斷，不會引起氨基酸殘基側鏈的修飾（氧化、鹵化、脫酰胺等）。而且，被修飾殘基（糖鏈、類脂體、磷酸、硫酸等的結合部位）的肽一般以完整形態被回收，而且具有良好的回收率。如果采用同樣的消化條件可以實現高再現性的分段。使用底物特異性高的酶進行蛋白質的結構分析，可預測氨基酸組成的大體片段數和平均大小，并且重要的是可以避免由于部分切斷（非特異性切斷），導致分離的復雜化。

      本品由Drapeau系列的Staphylococcus aureus（V8菌株）分離而成，是特異性切斷谷酰胺產的羧基側鏈的酶。分別切斷磷酸系列緩沖液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基側鏈、氨系列緩沖液中包含谷氨酸羧基側鏈的肽結合酯結合。因為其高底物特異性，本品被用于各種蛋白質序列分析時的肽分段。

 

 

◆特異性

 

      切斷氨緩沖液中包含谷氨酸羧基側鏈的肽結合和酯結合。切斷磷酸緩沖液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基側鏈的肽結合和酯結合。 

活性：20 units/mg以上

單位的定義：以2-Phe-Leu-Glu-4-NA為底物，在pH7.8，25℃情況下，1分鐘生產1 μmol 4-硝基苯胺所需酶的量為1 unit。

反應：特異性切斷谷氨酸的羧基側鏈。

 

 

◆使用方法

 

僅切斷谷氨酸羧基

 

      在0.01~0.1 mol/L碳酸氫銨（pH7.8）或者在0.01~0.1 mol/L醋酸銨（pH4.0）中，酵素：底物（mol/mol）=1：30~100，在30~37℃情況下，分解2~24小時。

 

 

同時切斷天冬氨酸羧基

 

      在0.01~0.1 mol/L磷酸緩沖液（pH7.8）中，以同樣條件分解。

 

用途：各種蛋白質的序列分析的肽分段。

pH情況：

.佳pH：在pH3.5~9.5范圍有蛋白酶活性。pH4.0及pH7.8時，活性大（以血紅蛋白為底物）。

抑制情況：主要抑制劑：DFP

 

 

◆使用上應注意

 

穩定性

 

      pH值為4~10時，物質穩定。冷凍干燥或冷凍，保存時間較長。在0.2%的SDS中，具有100%活性：在4 mol/L尿素中，具有50%活性。

 

 

◆產品列表

 

產品編號	產品名稱	規格
164-13982	V8蛋白酶	2 mg
050-05941	測序級谷氨酰蛋白內切酶Glu-C	50 μg
056-05921	測序級天冬氨酰蛋白內切酶Asp-N	2 μg