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禽網狀內皮組織增殖病病毒RT-PCR試劑盒返回列表頁

舉報評價

參考價: ￥ 1990 ￥ 1790

訂貨量: 1-4 件 ≥5 件

具體成交價以合同協議為準

產品型號50次

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廠商性質生產商

所在地上海

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更新時間：2020-07-23 15:39:34瀏覽次數：523次

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產品分類品牌分類

PCR試劑盒: PCR-染料法 PCR-探針法

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產品簡介

供貨周期	一周	規格	50T
貨號	XY-0087	應用領域	醫療衛生,環保,化工,生物產業,農林牧漁
主要用途	熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。

禽網狀內皮組織增殖病病毒RT-PCR試劑盒會引起鮑病毒病，危害的主要對象是我國南方養殖的九孔鮑、雜色鮑，北方地區養殖的皺紋盤鮑。該病潛伏期短，發病急，傳染性強，死亡率高，造成鮑種苗及成鮑的大量死亡，4～30d 內死亡率高達 95%以上，溶藻膠弧菌和副溶血弧菌可能會和病毒共同感染鮑并且是鮑病的共同致病因子。

詳情介紹

禽網狀內皮組織增殖病病毒RT-PCR試劑盒

Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)

產品及特點

網狀內皮增殖病是由網狀內皮組織增殖癥病毒（Reticuloendotheliosis Virus， REV）引起的一種腫瘤性傳染病，病雞表現為貧血、消瘦，生長緩慢等。病理解剖特點是肝臟、腸道、心臟和其它器官有淋巴瘤，胸腺和法氏囊萎縮，腺胃炎。本病能侵害機體的免疫系統，可導致機體免疫機能下降或繼發其它疾病。本產品就是專門用于 REV 的 RT-PCR 檢測的試劑盒，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供病毒 RNA 模板。

2. 提供陽性對照，便于在遇到問題時分析原因。

3. 引物根據 REV 病毒保守的 LTR 序列設計，不與其他病毒發生交叉反應。

4. 使用兩步式 RT-PCR，先做 RT 再做 PCR，操作更加靈活。

5. 本試劑盒靈敏度可以達到 1000 拷貝/反應。

6. 本試劑盒足夠 50 次 20 μL 體系的 RT 反應，50 次 40 μL 體系的 PCR 反應。

7. 本產品只用于科研

禽網狀內皮組織增殖病病毒RT-PCR試劑盒規格及成分

編號	成分	規格
試劑一	MMLV（含 RI）	50 μL（黃蓋）
試劑二	RT Buffer（含 dNTP）	250 μL（白蓋）
試劑三	超純水	1 mL（本色蓋））
試劑四	PCR MagicMix 3.0（含染料）	1 mL（紅蓋）
試劑五	網狀內皮組織增殖癥病毒 RT-PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑六	網狀內皮組織增殖癥病毒 RT-PCR 陽性對照	50 μL（黃蓋）
試劑七	RNA 病毒裂解液（試用裝）	15 次（10mL）
試劑八	使用手冊	1 份

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。收到試劑盒后請將陽性對照放置到專門區域，因為其含有較高濃度的擴增產物，容易污染其他試劑。

自備試劑 樣品RNA

使用方法 一、樣品 RNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 禽傳染支氣管炎病毒通用 RT-PCR 陽性對照的 100 倍稀釋的（稀釋后濃度為 1×10E6 拷貝/μL， 10μL 相當于 1 萬拷貝，可以將 10μL 原液加入到 990μL 自備 TE 溶液中，充分混勻，此為 100 倍稀釋液。）再加上一定量的水作為制備的陽性對照（加水后其總體積跟樣品一樣，樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求）。可以用水作為制備的陰性對照。制備所得成為樣品 RNA。

2. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提取試劑盒兼容。

二、設置 RT-PCR 反應（20μL 體系）

3. 如果有 N+2 次 RNA 提取，則按照下表設置 N+2 個 RT 反應體系（20 μL 體系）：

成分	用量
RNA 模板（自備）	1-10 μL 即可
網狀內皮組織增殖癥病毒 RT-PCR 引物混合液	2 μL
超純水	補水到 14 μL
RT Buffer(含 dNTP)	5 μL
MMLV（含 RI）	1 μL

4. 42℃保溫 60 min，70℃保溫 10 min 以終止反應，然后放置在冰上待用。此為 cDNA 樣品。

三、設置 PCR 反應

5. 對 N+2 個 cDNA 樣品，則在 N+4 個 PCR 管中加入下列成分（多的一個是 PCR 陰性對照，一個是 PCR 陰性對照）：

成分	N+2個制備所得樣品	PCR 陰性對照	PCR 陽性對照
PCR MagicMix 3.0	20 μL	20 μL	20 μL
網狀內皮組織增殖癥病毒 RT-PCR 引物混合物	2 μL	2μL	2μL
N+2 個 cDNA 樣品	5 μL
網狀內皮組織增殖癥病毒 RT-PCR 陽性對照
補超純水到	40 μL	40 μL	40 μL

6. 上機進行 PCR，PCR 反應參數為：

過程	溫度	時間
逆轉錄	42℃	60 min
預變性	94℃	5 min
PCR 反應（35 個循環）	94℃	0.5 min
	55℃	0.5 min
	72℃	0.5 min
后延伸	72℃	10 min

7. 取 10uL PCR 產物直接在 1%瓊脂糖凝膠上電泳，正確的擴增產物的大小為 220 bp。陽性對照必須出現 220bp 的 PCR 產物，否則 RT-PCR 體系有問題，需要尋找原因。如果陰性對照出現 220bp 的 PCR 產物，則說明試劑或環境中有過去 PCR 產物的污染，需要把樣品制備和 PCR 反應后電泳充分隔離進行。如果發生了污染，則需要另外設計引物，本試劑盒提供的引物和陽性對照將不可用。