禽類(lèi)支原體通用PCR試劑盒

Avian Mycoplasma spp.

產(chǎn)品及特點(diǎn)

禽支原體病是由禽類(lèi)支原體（Avian Mycoplasma spp.）引起的家禽的一 種傳染病，主要包括雞敗血支原體病、雞傳染性滑液膜炎和火雞支原體病。禽 支原體病幾乎在世界各地都有發(fā)生，已成為雞群和火雞群的一個(gè)重要問(wèn)題。危 害的雞只達(dá) 13%以上，使其體重減少 38%，飼料轉(zhuǎn)化率降低 21%。在火雞中， 可引起竇炎、氣囊炎和以高死亡率為特征的傳染性竇炎。本試劑盒是根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)，具有下列特點(diǎn)： 

1. 免 DNA 制備，直接用裂解液做 PCR，更加簡(jiǎn)單快捷。

2. 根據(jù)禽類(lèi)支原體保守區(qū)設(shè)計(jì)引物。

3. 特異性高，跟其他微生物無(wú)交叉反應(yīng)。

4. 靈敏高，可檢測(cè)低至幾個(gè)拷貝/反應(yīng)的支原體污染。

5. 提供內(nèi)參和無(wú)感染性的支原體陽(yáng)性對(duì)照（DNA 段），能有效避免實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的假陽(yáng)性和假陰性。

6. 可用于培養(yǎng)細(xì)胞、疫苗、血清、重組蛋白和耗材的污染檢測(cè)。但不能用于 臨床診斷。

7. 本產(chǎn)品足夠至少 50 次 40μL 體系 PCR 檢測(cè)(含陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照反應(yīng))。

禽類(lèi)支原體通用PCR試劑盒規(guī)格及成分

運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其 他試劑。  

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個(gè)樣品，必須設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的一個(gè)是 PC（樣品制備陽(yáng) 性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?10μL 陽(yáng)性對(duì)照的 10000 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣， 以此作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸純化試劑盒兼 容。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品，在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性 對(duì)照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測(cè)

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。