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供貨周期 | 一周 | 規格 | 50T |
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貨號 | XY-0056 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農林牧漁 |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
煙曲霉PCR試劑盒
Aspergillus fumigatus
產品及特點
煙曲霉(Aspergillus fumigatus.)屬殼霉目、杯霉科、煙曲霉屬,是一種重 要的致病菌,也是引起食品的一種真菌。煙曲霉的菌落生長迅速,絨狀或 作一定的絮狀,暗煙綠色,老后色變得更深。此菌嗜高溫,在 45℃或更高的溫 度下生長茂盛。在糧食發熱霉變的中期和后期常大量出現,促進糧溫的升高和 敗壞。煙曲霉能寄生在人、鳥類及其它脊椎動物的肺部引起結核癥。也能侵染 棉鈴和蘋果等,引起果實腐爛,或寄藏于種子上。因此快速檢測煙曲霉具有重 要意義。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的產品,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供細菌 DNA 模板。
2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增氣單胞菌 DNA,跟其他微生物無交 叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產品只能用于科研。
煙曲霉PCR試劑盒規格及成分
編號 | 成分 | 規格 |
試劑一 | PCR Magic Mix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 煙曲霉 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 煙曲霉 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑試用裝 | 20 次(1mL、綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 陽性對照的 100 倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作 為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數細菌 DNA 提取試 劑盒兼容。也可以選購本公司的細菌 DNAout 或柱式細菌 DNAout。本試 劑盒免費贈送 20 次免 DNA 提取的天凈沙核酸釋放劑,本產品的裂解液可 以直接作為 PCR 模板,省略了 DNA 提取步驟。
二、設置 PCR 反應(40 μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | PCR 陽性 對照管 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
煙曲霉 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(超純水) |
| 18 μL |
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PCR 陽性對照(煙曲霉 PCR 陽性對 照的 10000 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設置 PCR 反應
過程 | 溫度 | 時間 |
預變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應 (35個循環) | 95℃ | 30 sec |
55℃ | 30 sec | |
72℃ | 60 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR 產物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現,陰性對照必須無任何擴 增,否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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