CT-2A （小鼠膠質母細胞瘤細胞 ）

 二、細胞接收后的處理

1) 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2) 離心管直接在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，培養基重懸細胞后，根據離心后的沉淀量進行傳代，轉移至T25培養瓶中后，請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3) 懸浮細胞：傳代時使用【半換液法】對細胞狀態有利，因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代，剛收到細胞時建議1:2傳代較為合適。

4) 備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。 

三、細胞培養操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含8mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

【半換液法】懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養瓶中添加培養基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1×10⁵~1×10⁶個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。

【離心換液法】如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。