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許多實時 PCR 儀都需要內部參比染料，以便標準化熒光信號和糾正孔間光學變異。 ROX 惰性參比染料允許在所有依賴 ROX 的實時系統上使用不包含 ROX 的 PCR 試劑。 由于不同儀器平臺的激發光學系統有所不同，因此的參比染料濃度必須與給定的實時循環儀相匹配。 此染料已按配方制備成 50x 濃縮原液，供在 ABI PRISM 7000、7300、7700 或 7900 系統上使用。 對于使用 580–585 nm 激發進行惰性參比的儀器（例如 Stratagene Mx4000、Mx3000P 或 Mx3005P，或者 ABI PRISM 7500 序列檢測系統），應該將 ROX 惰性參比染料視為 750x 濃溶液。Bio-Rad 實時熒光定量 PCR 系統無需使用內部參比染料。