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人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
【產品名稱】:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
【英文名稱】:Human lipocalin 2,LCN2 Elisa Kit
【保存條件】:攝氏2-8度環境中保存。
【產地】:國產,進口
青島捷世康生物科技有限公司長期從事生物試劑產品的研發與銷售,公司堅持走創新研發的理念,與國內眾多高校以及科研單位保持著良好的溝通與合作。我公司目前擁有多位博士,碩士組成的科研團隊,為您的實驗提供可靠的科研耗材及專業的。我司另提供免費代測服務,如因檢測樣本珍貴稀缺,擔心運輸途中樣品的損毀,我司將提供上門取樣服務。
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免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優質的診斷試劑離不開優質的原料,如抗原抗體,酶等。
ELISA試驗中形成的原因和消除方法:ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
ELISA試驗中,經常會碰到陰性本底的問題。主要是本底過高和不同標本的本底值差異較大,本底在ELISA中的非特異性顯色。底物未經過酶作用而呈現的顏色稱為空白。底物液如配置不當會出現一定的空白值。這個值只要不太高(A<0.05),可以從各測定值減除,并不影響實驗結果。這里討論的是不含代測抗原或抗體的陰性標本在ELISA中出現本底。
固相載體的吸附:ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
在酶免疫測定中,ELISA中的特點是利用固相載體作為分離游離和結合的酶結合物的手段。固相載體與吸附在其上的抗原或抗體形成固相抗原或固相抗體,即免疫吸附劑。通常所用的固相載體聚苯乙烯其表面主要是疏水基團,通過疏水鍵與蛋白質結合。這種吸附石物理性的非特異性吸附,雖然蛋白質的分子量,等電點,濃度等對吸附的量有一定的影響,蛋總的來說各種蛋白質均能吸附在聚苯乙烯載體的表面。因此除在包被時有目的地使抗原或抗體吸附在載體上外,在ELISA各個步驟中均有可能發生干擾物質的吸附,使zui終產生與受檢抗原-抗體反應無關的顯色,這是形成本底的主要原因。
陽性的顯色和陰性的本底ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
夾心法試驗中,陽性標本中含有檢測系統中特異性的抗原或抗體,作為橋梁聯結免疫吸附劑和酶結合物,使酶結合物吸附在固相上,無色底物在酶的作用下轉變成有色產物,這就是陽性的顯色,顯色的深度與陽性標本中代測抗體或抗原的量成正比。陰性標本中不含代測的抗原或抗體,酶結合物不能聯結在固相上,固不顯色。酶結合物在固相上的非特異吸附通常有以下幾條途徑1·酶結合物直接吸附在固相載體上。酶結合物是蛋白質,可以直接吸附在固相載體表面,試驗中選擇了不利于這種媳婦的條件,一般只要酶結合物工作濃度適當,反應一段時間后,經過*洗滌,可以避免這種吸附。(ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒)2·酶結合物與固相上包被蛋白質成分起反應。包被抗原不純時,雜質蛋白也會吸附在固相載體上,某些雜質可與酶標抗體因 錯認 而結合。3·雙抗體夾心法中標本中含有類風濕因子,也可能使陰性血清顯色。類風濕因子是作用于多種動物IgG Fe段的自身抗體,多位IgM類,之一種多價抗體。在夾心法檢測中充當抗原成分,同時與固相抗體及酶標抗體反應,是酶標抗體結合到載體上。6·在ELISA中引入生物素-親和素系統,可以提高檢測的靈敏度,但如果使用不當,可使本地加深,反而得不償失。生物素表及蛋白質如比例不合適,極易形成較高的陰性本底。
降低陰性本底主要有以下幾個方面:ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
1·固相載體:在ELISA試驗中有時碰到空白孔吸光值過高或高或赴孔實驗結果差異很大,其原因可能與酶標板質量有關ELISA試劑盒:人脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試劑盒
2·包被抗原:包被抗原應先經純化。從人血或組織中提取的抗原成分如HB-sAg,要*除去Ig雜質是很困難,用基本因工程從組抗原可以避免這種干擾。
3·酶標抗體:應采用高效價的酶標抗體,工作濃度高,稀釋度大就可以減少吸附。
4·緩沖液:配制試劑的蒸餾水的質量十分重要,以新鮮重蒸為宜,去離子水應檢驗合格。緩沖液的PH值應該用PH計校正,配置后放置于2-8度環境中以免變質。PBS可大量配置后分裝高壓滅菌保存。
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