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HPLC柱對亞甲基二磷酸的保留和峰形調節
App ID: FLM-C210052
方法:自定
色譜柱:Comixsil HAX 3µ 100*4.6mm(貨號:FMD-HAX3-EONU )
流速:1.0 mL/min
檢測:ELSD,45℃,2.5 L/min
柱溫:30 ℃
流動相:A(H2O):B(ACN):C(1% TFA)
亞甲基二磷酸四鈉
流動相1:
T/min | A(H2O)% | B(ACN)% | C(1% TFA)% |
75 | 20 | 5 |
流動相2:
T/min | A(H2O)% | B(ACN)% | C(1% TFA)% |
70 | 20 | 10 |
流動相3:
T/min | A(H2O)% | B(ACN)% | C(1% TFA)% |
60 | 20 | 20 |
流動相4:
T/min | A(H2O)% | B(ACN)% | C(1% TFA)% |
0-10 | 75-60 | 20 | 5-20 |
流動相5:
T/min | A(H2O)% | B(ACN)% | C(1% TFA)% |
0-5 | 75-60 | 20 | 5-20 |
HPLC柱對亞甲基二磷酸的保留和峰形調節 圖譜數據:
流動相條件 | 保留時間 | 柱效 | 拖尾因子 |
流動相 1 | 10.743min | 2405 | 0.693 |
流動相 2 | 3.636min | 1543 | 0.793 |
流動相 3 | 1.920min | 1664 | 1.242 |
流動相 4 | 5.982min | 5097 | 0.831 |
流動相 5 | 5.086min | 6097 | 0.905 |
HPLC柱對亞甲基二磷酸的保留和峰形調節 方法開發說明:
本實驗選擇 Comixsil HAX 這款陰離子交換+HILIC 作用混合模式色譜柱,在陰離子交換模式下,考察了不同濃度的酸以及酸梯度下對亞甲基二磷酸的保留和峰形的影響。亞甲基二磷酸的保留對酸的濃度比較敏感, 實驗表明,當使用酸的梯度時,可以改善其峰形,且縮短梯度時間時,可以進一步改善峰形。這在混合模式方法開發中是非常普遍的改善峰形的方式,謹以此應用數據供使用者參考。