12
大鼠鈣網(wǎng)蛋白（CRT）試劑盒
大鼠鈣網(wǎng)蛋白（CRT）試劑盒，是生物科研領(lǐng)域用于精準(zhǔn)檢測大鼠樣本中 CRT 含量的專業(yè)工具，在細胞生物學(xué)、生理學(xué)及相關(guān)疾病研究中發(fā)揮著重要作用。鈣網(wǎng)蛋白廣泛存在于真核細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是一種多功能鈣結(jié)合蛋白，不僅在細胞內(nèi)鈣離子穩(wěn)態(tài)維持方面發(fā)揮關(guān)鍵作用，還深度參與蛋白質(zhì)折疊、質(zhì)量控制以及免疫調(diào)節(jié)等生理過程。在大鼠的細胞應(yīng)激反應(yīng)、疾病發(fā)生發(fā)展進程中，CRT 的表達水平和功能狀態(tài)會發(fā)生顯著變化，準(zhǔn)確測定其含量，有助于深入探究細胞的生理病理機制，為相關(guān)研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。
該試劑盒運用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)，通過雙抗體夾心 ELISA 法開展檢測工作。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板已預(yù)先包被針對大鼠 CRT 的特異性抗體。檢測時，將待檢測樣本，如大鼠血清、血漿、組織勻漿（如肝臟、心臟等組織）或細胞培養(yǎng)上清等，與已知濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品依次加入酶標(biāo)板的反應(yīng)孔中。樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的 CRT 會特異性地與包被抗體結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。接著加入酶標(biāo)記的另一種 CRT 抗體，該抗體能夠與已結(jié)合在包被抗體上的 CRT 進一步結(jié)合，構(gòu)建起 “包被抗體 - CRT - 酶標(biāo)抗體" 的夾心結(jié)構(gòu)。經(jīng)過充分溫育，確保抗原 - 抗體結(jié)合反應(yīng)充分進行，再通過多次嚴(yán)格的洗滌步驟，將未結(jié)合的多余物質(zhì)徹di去除。此時加入顯色底物，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色變化程度與樣本中 CRT 的含量呈正相關(guān)。科研人員借助酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度，依據(jù)預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可精確計算出樣本中 CRT 的含量。
試劑盒組成豐富合理。包被有特異性抗體的酶標(biāo)板是反應(yīng)的核心載體，為檢測反應(yīng)提供穩(wěn)定的場所；不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品用于構(gòu)建精準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，為樣本定量提供可靠參照，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；酶標(biāo)抗體負責(zé)催化顯色反應(yīng)，放大檢測信號，使檢測結(jié)果更易于觀察和分析；樣本xi釋液用于對原始樣本進行合理稀釋，使其符合檢測要求，拓寬樣本檢測范圍；濃縮洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板，有效去除未結(jié)合雜質(zhì)，保障檢測結(jié)果不受干擾；此外，還配備有顯色劑和終止液，用于精準(zhǔn)控制顯色反應(yīng)的進程，確保檢測過程的規(guī)范性和結(jié)果的可靠性。
在樣本采集與處理方面，血清采集后需自然凝固并離心取上清；血漿采集時需添加合適抗凝劑后離心獲取上清；組織樣本需經(jīng)勻漿處理，充分破碎組織后離心取上清；細胞培養(yǎng)上清可直接離心取上清用于檢測。樣本處理完成后，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明，依次進行加樣、溫育、洗滌、顯色及結(jié)果測定等步驟。試劑盒一般需保存在 2 - 8℃的環(huán)境中，避免反復(fù)凍融，以維持其良好性能，為大鼠相關(guān)科研工作提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，助力科研人員深入探索細胞生理病理奧秘，推動生物醫(yī)學(xué)研究不斷向前發(fā)展。
