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樣本采集：根據檢測需求，采集合適的生物樣本。例如，采集靜脈血用于血清或血漿樣本制備，采集尿液、唾液等其他生物液體樣本時遵循相應的規范操作。確保樣本采集過程規范，避免污染和樣本量不足等問題。
試劑盒準備：從儲存環境中取出試劑盒，平衡至室溫（通常為 20℃ - 25℃），同時準備好移液器、吸頭、酶標儀等實驗器材，并檢查其性能是否正常。
加樣：將標準品、待測樣本以及空白對照按規定體積準確加入微孔板相應孔中，輕輕振蕩混勻，使樣本與固相載體上的物質充分接觸，然后在設定的溫度和時間條件下孵育。
洗板：孵育結束后，棄去孔內液體，用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次，以徹di清除未結合的物質，減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干，防止殘留液體影響后續反應。
加酶標物：向各孔加入適量酶標物，振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止：加入底物顯色液，在避光條件下孵育，待顏色變化至合適程度時，加入終止液終止反應，使反應停止在最佳檢測狀態。
結果測定：立即使用酶標儀在規定波長下測定各孔 OD 值，根據標準曲線計算出樣本中目標物的含量。
高靈敏度：能夠檢測到極低濃度的目標物，滿足對微量樣本或低表達水平生物標志物的檢測需求。
特異性強：試劑盒中的抗體或抗原對目標物具有高度特異性，與其他類似物質交叉反應極小，保證檢測結果的準確性。
重復性好：同一批樣本多次檢測結果穩定，變異系數小，為科研及臨床診斷提供可靠且可重復的數據支持。
臨床診斷：用于輔助診斷多種疾病，如感染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤等，通過檢測相關生物標志物的含量，為醫生提供診斷依據。
疾病監測：跟蹤疾病的發展進程和治療效果，例如監測腫瘤患者治療過程中腫瘤標志物的變化，以評估治療方案的有效性。
科研領域：在基礎醫學研究中，用于探究疾病的發病機制、藥物研發過程中的藥效評估等。