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OFQ ELISA
OFQ ELISA，即針對孤啡肽（OFQ）開展的酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)，在神經(jīng)科學(xué)研究以及多種相關(guān)疾病的探索中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。孤啡肽是一種內(nèi)源性神經(jīng)肽，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布，參與調(diào)節(jié)痛覺、情緒、認(rèn)知、內(nèi)分泌以及心血管功能等諸多生理過程，其含量變化與多種神經(jīng)精神疾病及其他系統(tǒng)病癥密切相關(guān)。
該技術(shù)基于抗原與抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理。在 OFQ 試劑盒中，酶標(biāo)板已預(yù)先包被針對 OFQ 的特異性抗體。當(dāng)含有 OFQ 的樣本，如腦脊液、血漿、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清等加入酶標(biāo)板孔后，樣本中的 OFQ 會迅速與包被抗體特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對 OFQ 不同抗原表位的檢測抗體，二者結(jié)合形成穩(wěn)定的 “包被抗體 - OFQ - 酶標(biāo)抗體" 三明治結(jié)構(gòu)。接著添加酶的底物，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號，常見為顏色變化或熒光信號。通過酶標(biāo)儀測量信號強(qiáng)度，并與試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，即可精確計(jì)算出樣本中 OFQ 的含量。
OFQ 試劑盒組成較為全面，一般包含預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板，不同濃度的 OFQ 標(biāo)準(zhǔn)品用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，酶標(biāo)抗體工作液、底物、終止液，以及用于清洗未結(jié)合物質(zhì)的濃縮洗滌液等。同時(shí)，配備詳細(xì)的操作說明書，為實(shí)驗(yàn)人員提供準(zhǔn)確的操作指導(dǎo)，涵蓋樣本采集、處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果判讀等各個(gè)環(huán)節(jié)。
在操作流程上，首先要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求采集合適的樣本，例如研究神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)問題時(shí)，腦脊液樣本較為常用；而在全身性疾病研究中，血漿樣本可能更為合適。采集后的樣本需及時(shí)進(jìn)行離心等處理以獲取清亮的待測液。將樣本和試劑盒中的試劑平衡至室溫后，嚴(yán)格按照要求對樣本及試劑進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋。然后精確加樣到酶標(biāo)板，在適宜溫度下溫育一段時(shí)間，確保抗原抗體充分反應(yīng)。之后用洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板，徹di去除未結(jié)合物質(zhì)，減少非特異性信號干擾。接著依次加入酶標(biāo)抗體工作液、底物，按規(guī)定時(shí)間反應(yīng)，最后加入終止液終止反應(yīng)，并立即用酶標(biāo)儀檢測信號。
OFQ試劑盒 技術(shù)具備操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)勢。在基礎(chǔ)神經(jīng)科學(xué)研究中，有助于深入探究 OFQ 在正常生理狀態(tài)下的神經(jīng)調(diào)節(jié)機(jī)制以及在疾病發(fā)生發(fā)展過程中的病理生理變化。在臨床應(yīng)用方面，可輔助多種疾病的診斷、病情監(jiān)測及預(yù)后評估，例如在慢性疼痛綜合征、抑郁癥、焦慮癥、心血管疾病以及某些內(nèi)分泌紊亂疾病的研究中，通過檢測 OFQ 含量變化，能為疾病的診療方案制定提供重要依據(jù) 。