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N-MID-OT ELISA 借雙抗夾心法,精準測血清中 N 端中段骨鈣素含量。用于骨質疏松等骨病診斷、兒童骨骼發育評估,靈敏特異、操作簡便。
N-MID-OT ELISA
N-MID-OT ELISA是一種專門用于精準定量檢測血清中 N 端中段骨鈣素(N-MID Osteocalcin)含量的技術。骨鈣素是一種由成骨細胞合成并分泌的非膠原蛋白,在骨骼的礦化和代謝過程中發揮著關鍵作用。N 端中段骨鈣素作為骨鈣素的一種穩定片段,其在血清中的含量變化能夠準確反映成骨細胞的活性以及骨代謝的動態平衡狀態,因此該檢測技術在骨骼健康相關研究和臨床診斷中具有重要意義。
工作原理
N-MID-OT ELISA 運用經典的酶聯免疫吸附測定(ELISA)原理,采用雙抗體夾心法對 N 端中段骨鈣素進行檢測。試劑盒內的微孔板表面,預先已牢固包被針對人 N-MID Osteocalcin 的特異性抗體。當含有 N-MID Osteocalcin 的血清樣本加入到微孔板的反應孔中時,樣本里的 N-MID Osteocalcin 會迅速與包被抗體發生特異性結合,形成抗原 - 抗體復合物。緊接著,向反應體系中添加酶標記的另一種針對 N-MID Osteocalcin 不同抗原表位的抗體。這種酶標抗體能夠特異性地識別并結合已經與包被抗體結合的 N-MID Osteocalcin,進而構建起穩定的 “包被抗體 - N-MID Osteocalcin - 酶標抗體" 免疫復合物結構。完成結合步驟后,通過多次嚴格且細致的洗滌操作,將未參與特異性結合的多余試劑、雜質以及未結合的抗體等物質徹di清除,以此確保反應體系的純凈度和檢測結果的準確性。最后,加入酶的特異性底物。此時,與免疫復合物相連的酶會對底物進行高效催化,引發底物發生化學反應,進而產生顏色變化。而顏色變化的程度,也就是顏色的深淺,與樣本中 N-MID Osteocalcin 的實際含量呈正相關關系。借助專業的酶標儀精確測定反應孔的吸光度值,并將該值與試劑盒所提供的標準曲線進行仔細比對分析,就能夠準確無誤地計算出樣本中 N-MID Osteocalcin 的濃度數值。
應用場景
骨質疏松癥診斷與病情監測:骨質疏松癥是一種以骨量減少、骨組織微結構破壞為特征,導致骨脆性增加、易發生骨折的全身性骨病。在骨質疏松癥患者中,骨代謝失衡,成骨細胞活性改變,血清 N-MID Osteocalcin 水平會發生相應變化。通過 N-MID-OT ELISA 檢測患者血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,有助于早期診斷骨質疏松癥。例如,絕經后女性由于雌激素水平下降,骨轉換加快,血清 N-MID Osteocalcin 水平往往升高,檢測該指標可輔助判斷其患骨質疏松癥的風險。并且,在骨質疏松癥治療過程中,持續監測 N-MID Osteocalcin 水平的變化,可有效評估治療效果。若治療有效,N-MID Osteocalcin 水平會逐漸趨于正常,提示骨代謝逐漸恢復平衡。
兒童骨骼發育評估:在兒童生長發育過程中,骨骼的正常生長和礦化至關重要。N-MID Osteocalcin 水平與兒童骨骼的生長速率密切相關。使用 N-MID-OT ELISA 檢測兒童血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,能夠評估其骨骼發育情況。對于生長發育遲緩或骨骼發育異常的兒童,檢測該指標有助于分析病因,制定合理的營養干預或治療方案。例如,在維生素 D 缺乏性佝僂病患兒中,由于鈣磷代謝紊亂,影響骨骼礦化,血清 N-MID Osteocalcin 水平可能出現異常,通過檢測可及時發現并指導治療。
代謝性骨病研究:在一些代謝性骨病,如甲狀旁腺功能亢進癥、腎性骨病等疾病中,骨代謝受到不同程度的影響,N-MID Osteocalcin 含量也會發生改變。通過 N-MID-OT ELISA 檢測患者血清中的 N-MID Osteocalcin 含量,可輔助診斷代謝性骨病,了解疾病的進展情況,并為治療方案的制定提供依據。例如,在甲狀旁腺功能亢進癥患者中,甲狀旁腺激素分泌過多,導致骨吸收增加,血清 N-MID Osteocalcin 水平可能升高,檢測該指標有助于判斷病情嚴重程度和評估治療效果。