樣本收集:依據實驗需求,采集適量人血清、血漿或細胞培養上清等樣本。血清樣本需在血液自然凝固后離心獲?。谎獫{樣本則需使用抗凝劑處理血液后離心得到;細胞培養上清按細胞培養規范收集并離心去除細胞碎片等雜質。收集后的樣本應妥善保存,避免反復凍融。
試劑盒準備:從冰箱取出試劑盒,室溫平衡 30 分鐘,使試劑盒內各試劑溫度與室溫一致,減少溫度差異對實驗結果的影響。同時,準備好實驗所需的移液器、吸頭、酶標儀等器材,并確保其性能良好。
加樣:將標準品、待測樣本及空白對照按規定體積準確加入微孔板相應孔中,輕輕振蕩混勻,確保樣本與包被抗體充分接觸,然后在設定溫度下孵育一定時間。
洗板:孵育結束后,棄去孔內液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,以去除未結合的物質,減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需拍干微孔板底部殘留液體。
加酶標抗體:向各孔加入適量酶標抗體,振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止:加入底物顯色液,避光孵育,待顏色變化至合適程度時,加入終止液終止反應,使反應停止在最佳檢測狀態。
結果測定:立即使用酶標儀在規定波長下測定各孔 OD 值,根據標準曲線計算出樣本中雙花扁豆凝集素的含量。
高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的雙花扁豆凝集素,滿足對微量樣本或低表達水平的檢測需求。
良好的特異性:試劑盒中的抗體對雙花扁豆凝集素具有高度特異性,與其他類似物質交叉反應極小,保證檢測結果的準確性。
重復性佳:同一批樣本多次檢測結果穩定,變異系數小,實驗結果可靠,為科研及臨床診斷提供可重復性數據支持。