樣本收集:依據實驗需求,收集適量的人或小鼠血清、血漿、細胞培養上清等樣本。血清樣本需待血液自然凝固后離心獲取;血漿樣本則需在采血時加入抗凝劑,隨后離心分離;細胞培養上清按標準細胞培養流程收集,并通過離心去除細胞碎片等雜質。收集好的樣本要妥善保存,避免反復凍融影響檢測結果。
試劑盒準備:從冰箱取出試劑盒,放置在室溫(20℃ - 25℃)環境中平衡 30 分鐘,讓試劑盒內各試劑溫度均勻,同時準備好移液器、吸頭、酶標儀等實驗器材,并確保器材性能正常。
加樣:將標準品、待測樣本以及空白對照按規定體積準確加入微孔板對應孔中,輕輕振蕩使樣本與包被抗體充分混勻,隨后在設定溫度下孵育特定時間。
洗板:孵育結束,棄去孔內液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,以徹di清除未結合的物質,減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續反應。
加酶標抗體:向各孔加入適量酶標抗體,振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化達到理想程度時,加入終止液終止反應,使反應停止在最佳檢測狀態。
結果測定:立即使用酶標儀在規定波長下測定各孔 OD 值,根據標準曲線準確計算出樣本中嗜酸粒細胞趨化因子的含量。
高靈敏度:能夠精準檢測到極低濃度的嗜酸粒細胞趨化因子,滿足對微量樣本或低表達水平的檢測需求。
特異性強:試劑盒中的抗體對 ECF 具有高度特異性,與其他類似物質幾乎無交叉反應,確保檢測結果準確可靠。
重復性好:同一批樣本多次檢測結果穩定,變異系數小,為科研及臨床診斷提供了可靠且可重復的數據支持。