• 關鍵詞:基因組文庫(Genomic Library)構建服務|實驗技術服務

簡介：世界*品牌基因組文庫(Genomic Library)構建服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
基因組文庫(Genomic Library)構建服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：基因組文庫(Genomic Library)構建服務|實驗技術服務   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
基因組DNA文庫包括了基因組所有順序的隨機克隆片段。一個好的基因組DNA文庫的大小應足夠大，以便包括所有的基因DNA順序。DNA克隆片段也應足夠大，其中包括整個基因、連接基因及它們穩定形式所要的側翼順序。為了獲得高的克隆效率和較大的插入片段，λ噬菌體載體和質粒經常被使用構建基因組DNA文庫。λ噬菌體文庫易于操作，噬菌體載體上有多克隆位點。λ噬菌體能容納10-50kb插入DNA，載體類型應根據所要基因組DNA的大小和用途來選擇。
構建一個基因組DNA文庫的基本步驟：
①分離純化基因組DNA；
②切割DNA成合適大小的片段以用于克隆；
③載體DNA的制備；
④把基因組DNA段和載DNA連接；
⑤包裝重組分子；
⑥測定入噬菌體滴度；
⑦擴增DNA文庫；
⑧評估文的質量。
基因組文庫構建步驟：1、載體： 
l噬菌體：48.5kb,插入型(zui多可容納9kb)、取代型(可容納 38-51kb，zui適19-20kb)， EMBL, Charon 粘性質粒(Cosmid)：4-6kb, 質粒+噬菌體的性質，可容納大片段的外源基因，zui多可容納46kb。 酵母人工染色體克隆體系（YAC，Yeast Artificial Chromosome  Cloning System） 插入大小200—1000kb 2、 載體DNA的制備： 高分子量的外源DNA 100-150kb載體DNA酶切反應-----載體臂的純化-----載體脫磷處理 www.cqwestern。。ｃｏｍ（常用BamHI）   （蔗糖密度梯度離心）  （堿性磷酸酶） 3、連接和包裝：外源片段與兩臂之間的比例，包裝蛋白 4、感染宿主菌：選擇合適的宿主菌，LE392, NM538, NM539, KW251等 5、基因組文庫的保存和擴增： 6、測滴度，要在106fu以上
7、保存：氯仿4℃，7% DMSO -70℃
產生DNA段的方法要求切點隨機性高，使任一基因都可能被完整地克隆，并且在兩側都留有粘性末端以利于 DNA段間的連接。機械剪切方法的優點是隨機性高，可是所得片段兩端沒有粘性末端，有時較為不便與載體連接。用限制性核酸內切酶酶解的隨機性較差，但是兩端有粘性末端,便于和載體相連接（見重組DNA技術）。