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苯丙氨酸解氨酶含量檢測試劑盒說明書
分光光度法 貨號: BC0210 規格:50 管/48 樣
苯丙氨酸解氨酶含量檢測產品簡介： PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在于各種植物和少數微生物中，是植物體內苯丙烷類代謝的關鍵酶， 與一些重要的次生物質如木質素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關，在植物正常生長 發育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸 在 290nm 處有大吸收值，通過測定吸光值升高速率計算 PAL 活性。
試驗中所需的儀器和試劑： 紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1ml 比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 產品內容： 提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存； 試劑一：液體 40mL×1 瓶，4℃保存； 試劑二：粉劑×3 瓶，4℃保存，臨用前每瓶加入 4mL 雙蒸水充分溶解待用；現配現用。 試劑三：液體 2.5mL×1 瓶，4℃保存；
操作步驟：
一、粗酶液提取： 稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿。10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待 測。
二、測定操作表： 試劑名稱 測定管（μL） 對照管（μL） 樣本 20 試劑一 780 800 試劑二 200 200 混勻，30℃準確水浴 30min 試劑三 40 40 混勻，靜置 10min 后，用對照管調零，290nm 處記錄測定管吸光值 A (A=A 測定管-A 對照管)。
PAL活性計算： （1）按樣本蛋白濃度計算： 單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 ml 反應體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個 酶活力單位。 PAL（U/mg prot）=A×反應總體積（1040μL）÷樣本體積（20μL）÷反應時間(30min)÷0.1 ÷蛋白 濃度（mg/mL）=17.3×A ÷蛋白濃度（mg/mL） （2）按樣本鮮重計算： 單位的定義：每 g 組織在每 ml 反應體系中每分鐘使 290nm 下吸光值變化 0.1 定義為一個酶活力 單位。 PAL（U/g 鮮重）=A×反應總體積（1040μL）÷﹝樣本鮮重（g）×樣本體積（20μL）÷V 樣總（1mL）﹞ ÷反應時間(30min)÷0.1 =17.3×A ÷樣本鮮重（g）
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