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土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒

可見分光光度法

產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓
產品商標：solarbio
注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
貨號：BC0390
規格：50T/24S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：750
庫存狀態：現貨


產品簡介：
土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標。
氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在細胞呼吸過程中接受氫以后，被還原為三苯基甲臜（Triphenyl Formazone, TF），TF 呈現紅色，在波長485nm 處有大吸收峰，采用分光光度法于485nm 測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。

試驗中所需的儀器和試劑：
篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、玻璃比色皿，冰、蒸餾水、丙tong（不允許快遞，請用戶自備）。

產品內容：
試劑一：粉劑×1 瓶，使用前加30ml 水溶解，4℃避光保存（盡量現配現用）。
試劑二：液體50ml×1 瓶，4℃保存。
試劑三：丙tong，自備。

操作步驟：
一、樣本前處理：
1. 土壤樣品： 準確稱取過40 目篩的新鮮土壤樣品約0.1g（以保證TTC 與土壤顆粒充分接觸）。
2. 污泥樣品：污泥用蒸餾水洗滌，12000rpm，25℃，離心10 min，棄上清，反復3- 4 次。
二、測定操作：
                    對照管       測定管
樣品（g）        0.1            0.1
試劑一（ml） 0.5
試劑二（ml） 1 0.5
充分混勻，37℃，暗培養6h，取出后立即冰浴5min
試劑三（ml） 0.5 0.5
反復震蕩數次，37℃保溫10min，12000rpm，4℃，離心5min，取上清1ml 于1ml 玻璃比色皿，分光光度計提前30 分鐘預熱，蒸餾水調零，測定對照管和測定管，計算△A。

脫氫酶活力的計算：
酶活單位定義：在37℃時，每克樣品每小時使每ml 反應體系OD 值每增加0.01 為一個酶活單位。
計算公式：sDHA 活性（U/g）=0.01△ A÷培養時間（6h）÷樣品質量（0.1g）×V 反總（1.5ml）= 250×A485

注意事項：
1. 配制好的試劑一避光保存于4℃，在一周內使用，若出現紅色，則不能使用。
2. 試劑三易揮發，有毒，為了您的健康，請穿實驗服，戴口罩，戴乳膠手套操作。
3. 反應完成后立即冰浴以終止反應。
4. 如果測定出來的吸光值較大，減少樣品用量再進行測定，若吸光值過小則延長培養時間。
5. 試劑盒2-8℃保存。

相關文獻：
《SIRT5-mediated SDHA desuccinylation promotes clear cell renal cell carcinoma tumorigenesis》 作者:Yuanzhen Ma,Yijun Qi,Lei Wang,Zhaoxu Zheng,Yue 期刊:Free Radic. Biol. Med. 影響因子:5.657 PMID:30703481
 

土壤脫氫酶(S-DHA)活性檢測試劑盒