高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的大鼠 EGF,最小可檢測值可達皮克(pg)級別,滿足對微量樣本中 EGF 含量檢測的需求,為研究 EGF 在低表達水平下的生理功能和病理機制提供了有力支持。
良好特異性:試劑盒中的抗體經過精心篩選和優化,對大鼠 EGF 具有高度特異性,與其他相關蛋白及干擾物質幾乎無交叉反應,可有效避免假陽性結果的出現,確保檢測結果的準確性和可靠性。
重復性好:嚴格的生產工藝和質量控制體系保證了試劑盒批內和批間的重復性良好。多次重復檢測同一批樣本,所得結果的變異系數(CV)控制在極小范圍內,實驗人員能夠獲得穩定、可重現的數據,為科學研究的可重復性提供保障。
操作簡便:試劑盒配備了齊全的試劑和詳細的操作說明書,實驗步驟清晰明了,即使是新手實驗人員也能快速上手。整個檢測過程無需復雜的儀器設備和專業技能,大大節省了實驗時間和人力成本。
檢測范圍廣:該試劑盒的檢測范圍覆蓋了大鼠 EGF 在生理和病理狀態下常見的濃度區間,既能檢測正常生理條件下低水平的 EGF 表達,也能準確測定在疾病或實驗干預后可能出現的高水平 EGF 變化,適用于多種研究場景。
樣本準備:根據實驗需求收集大鼠的各種樣本,如血清、血漿、組織勻漿、細胞培養上清等。確保樣本采集過程規范,避免污染和溶血等情況影響檢測結果。樣本采集后如需保存,應置于 - 20℃或 - 80℃冰箱中,避免反復凍融。
試劑準備:將試劑盒從冰箱取出,平衡至室溫。按照說明書要求依次準備好標準品、酶標抗體、底物、洗滌液等試劑。標準品需進行倍比稀釋,以繪制標準曲線。
加樣:將已稀釋好的標準品和處理后的樣本加入到預包被有抗大鼠 EGF 抗體的微孔板中,同時設置空白對照孔。輕輕振蕩混勻后,將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱中孵育一定時間,使樣本中的 EGF 與包被抗體充分結合。
洗滌:孵育結束后,棄去孔內液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,以去除未結合的物質,減少非特異性背景信號。每次洗滌后需將微孔板拍干,確保洗滌效果。
加酶標抗體:向每孔中加入適量的酶標抗體,再次輕輕振蕩混勻,放入 37℃恒溫孵育箱中孵育一段時間,使酶標抗體與已結合在包被抗體上的 EGF 結合。
再次洗滌:重復洗滌步驟,以去除未結合的酶標抗體。
顯色:向每孔中加入底物工作液,輕輕振蕩混勻后,將微孔板置于 37℃避光孵育,此時酶標抗體上的酶會催化底物發生顯色反應,顏色會逐漸加深。
終止反應:當顯色達到預期效果后,加入終止液終止反應。此時溶液顏色將不再變化,應立即使用酶標儀在特定波長下測定各孔的吸光度值。