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RBP-4 ELISA通過抗原抗體特異性結合,定量測視黃/醇結合蛋白 4。操作簡便、重復性好,用于糖尿病診斷、營養評估、藥物研發等領域 。
RBP-4 ELISA
RBP-4 ELISA,即視黃/醇結合蛋白 4 酶聯免疫吸附測定(Retinol - Binding Protein 4 - Enzyme - Linked Immunosorbent Assay),是一種用于定量檢測生物樣本中視黃/醇結合蛋白 4 含量的常用實驗技術。視黃/醇結合蛋白 4 在體內主要參與維生素 A 的運輸與代謝,且其含量變化與多種生理和病理狀態相關。
該技術的原理基于抗原抗體的特異性結合。首先,將針對 RBP - 4 的特異性抗體包被在酶標板的微孔表面,此為捕獲抗體。當含有 RBP - 4 的樣本(如血清、血漿或組織勻漿)加入孔中時,樣本里的 RBP - 4 會與包被抗體特異性結合。接著,加入酶標記的另一種針對 RBP - 4 不同抗原表位的檢測抗體,它會與已結合在包被抗體上的 RBP - 4 結合,形成 “包被抗體 - RBP - 4 - 酶標檢測抗體" 的三明治結構。之后,向孔中添加酶的底物,酶標抗體上的酶催化底物發生化學反應,產生可檢測的信號,通常是顏色變化或熒光信號。通過酶標儀測量信號強度,并與事先制備好的標準曲線對比,就能精確計算出樣本中 RBP - 4 的含量。
RBP - 4 ELISA 操作相對簡便且具有良好的重復性。整個流程包括樣本準備、加樣、溫育反應、洗滌去除未結合物質、加底物顯色以及結果檢測等步驟。只要嚴格遵循實驗操作規程,不同實驗室間也能獲得較為一致的結果。
該技術在多個領域有著重要應用。在臨床診斷中,可輔助糖尿病及其并發癥的診斷與病情評估,因為研究發現糖尿病患者體內 RBP - 4 水平往往異常升高。在營養學研究里,能用于評估個體維生素 A 營養狀況,為合理膳食提供依據。在藥物研發方面,可作為監測藥物對維生素 A 代謝及 RBP - 4 水平影響的指標,助力新藥的開發與評價 。