目前，來源于肉類食品的飲食污染、其他食品或藥物誤服而導致的食源性興奮劑困擾事件層出不窮，食源性興奮劑的預防控制也成為各類體育賽事管理機構和供應服務基地保障的重要內容。
食源性興奮劑
食源性興奮劑是指來源于食品中的興奮劑，包括一般性食品及保健食品中從生產到加工過程中天然存在或故意添加而殘留的興奮劑成分，如肉類食品多次被爆出的“瘦肉精”。“瘦肉精”是一大類藥物的總稱從興奮劑的分類來看，它屬于β-腎上腺素受體激動劑。克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺是尤為常見的三種在畜牧養(yǎng)殖使用的“瘦肉精”，同時也是十分常見的人為服用興奮劑。[1]世界反興奮劑機構在其2021年的指導性文件里特別指出，如果克倫特羅、萊克多巴胺等四種違禁物質的陽性結果顯示濃度低于5納克/毫升，他們將進行調查。[2]
興奮劑成分檢測儀器靈敏度及相應物質的檢測標準的不斷提升、新技術的應用為反興奮劑管理機制提供了堅強保障。有關單位通過開展微生物檢驗、樣品制備管理等，高質量、高標準、高效率開展食品檢驗檢測工作，監(jiān)測評估食品安全風險，竭力保障食源性興奮劑“零檢出”，使運動員得以安心訓練備戰(zhàn)。[3]
食品中4種瘦肉精類殘留量測定
依據(jù)《GB/T 22286-2008 動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質譜法》，試樣中的β-激動劑經過酶解，用高氯酸調節(jié)pH值，沉淀蛋白后離心，上清液用氫氧化鈉調節(jié)pH后用異丙醇-乙酸乙酯提取，用陽離子交換柱凈化，采用液相色譜-串聯(lián)質譜法進行測定，內標法定量。
儀器和耗材
1 儀器
Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀；
Auto EVA 60全自動平行濃縮儀；
Agilent 1290II/6470 高效液相色譜-串聯(lián)質譜
MCX固相萃取柱（RayCure，60mg/3mL）
全自動固相萃取儀
全自動氮吹濃縮儀
2 試劑
乙酸乙酯、異丙醇、甲醇均為色譜純；甲酸、高氯酸、氨水、氫氧化鈉；β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶。
0.2mol/L乙酸鈉緩沖液：稱取13.6g乙酸鈉，溶解于500ml水中，用適量乙酸調節(jié)pH至5.2。
標準品：萊克多巴胺鹽酸鹽，克倫特羅鹽酸鹽，沙丁胺醇，特布他林硫酸鹽，100ng/ml。
內標物：沙丁胺醇-D3，克倫特羅-D9，10ng/ml。
樣品制備
1 酶解
準確稱取5g（精確到0.01g）經搗碎的樣品于50mL離心管內，加入0.2moL/L乙酸鈉溶液（pH=5.2）20mL，再加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶100μL，漩渦混勻，于37℃下避光水浴水解12h。
2 提取
添加1ml的內標工作液于待測樣品中，加蓋置于水平振蕩器震蕩15min，5000r/min高速離心10min，準確取10mL上清液于另一50mL離心管中，用高氯酸調節(jié)PH至1.0±0.3，4000r/min離心5min，將上清液轉移至另一50mL離心管中，用10moL/L氫氧化鈉溶液調節(jié)pH至11，加入4~5g氯化鈉，加入異丙醇：乙酸乙酯=6:4 15mL，充分提取，4000r/min離心5min，吸取全部有機相到睿科全自動氮吹濃縮儀EVA-60plus 50℃下氮氣吹干，加入0.2M乙酸銨溶液5mL溶解，超聲混勻，使殘渣充分溶解后備用。
3 凈化
將MCX固相萃取柱安裝在Raykol Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀上，依次用甲醇3 mL、水3 mL活化。備用液全部過柱，用水2 mL、2%甲酸水2ml、甲醇2 mL依次淋洗，抽干，用5％氨水甲醇溶液2 mL洗脫，收集洗脫液，使用EVA-60plus全自動氮吹濃縮儀于40℃水浴氮氣吹干，用10％乙腈水溶液（含0.1%甲酸）1.0 mL溶解，濾過，液相色譜-串聯(lián)質譜測定。具體的固相萃取方法見圖。
結果與討論
為了驗證該方法的回收率，本實驗分別在豬肉樣品中加入鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、特布他林4種混合標準品進行加標回收驗證(n=3)，加標水平為0.5ug/kg，數(shù)據(jù)如表-2所示。加標回收率在87.8-112.4%之間，RSD值控制在10%以內。說明該方法能夠很好地運用于豬肉中瘦肉精殘留量的檢測。
表-2.豬肉樣品加標回收率及RSD值
注：其中克倫特羅的內標為克倫特羅-D9；沙丁胺醇、特布他林與萊克多巴胺的內標為沙丁胺醇-D3。
本解決方案操作方便、提取和濃縮效率高、回收率好。符合GB/T 22286-2008《動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質譜法》要求。
食源性興奮劑的風險控制不僅要依靠檢測標準，還應借鑒“預防為主”原則，加強“從農田到餐桌”整個鏈條中食品安全的監(jiān)控，與時俱進的檢測方法和技術手段的應用利于防止誤食興奮劑事件的發(fā)生，運動員得以吃得健康、吃得安心。
參考文獻
[1]黃煒：運動員冬奧會期間不要吃中國肉！反興奮劑機構又來了……,觀察者網
[2]冬奧會食品符合食源性興奮劑“零檢出”特殊要求,新華每日電訊/2022 年/1 月/19 日/第 006 版
[3]嚴字當頭“零容忍” 全力以赴“零出現(xiàn)”——心懷“國之大者”，反興奮劑中心備戰(zhàn)北京冬奧會,國家體育總局反興奮劑中心
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