導讀
城市地下污水系統暗藏人們的生活痕跡，毒品在城市污水中也難以隱匿。毒品吸食后經人體代謝排入生活污水，運用科研儀器對污水進行DU情檢測、追根溯源，可進一步提升追DU查毒效率和準確度。
檢測方法
“污水驗DU”技術原理來源于“污水流行病學”，是采用“固相萃取-液相色譜-質譜聯用技術”對特定區域生活污水中的毒品及其代謝物含量進行檢測，結合污水水質參數和污水處理廠服務人口數量，推算出該區域吸DU人群規模、毒品消耗量等，進而評估該區域DU情形勢。由于城市每天產生大量的污水，而污水基質復雜，毒品的含量極低（ng/L級別），因此需要對污水樣品進行獨立的凈化富集后才能上機進行檢測，增加了檢測人員的工作強度和工作量。
本文基于以上考慮，建立了采用全自動固相萃取、LC-MS/MS定性定量同時測定污水水樣中5種常見毒品的方法。本方法采用MCX陽離子交換固相萃取柱富集水樣，5%氨化甲醇洗脫，LC-MS/MS進行上機分析，內標法定量。在0.1 μg/L的加標水平下，5種化合物的平均回收率在73.4%~93.9%之間，RSD值小于10.0%，符合分析與鑒定要求。說明該方法可作為污水驗DU的有效解決方案。
睿科應用方案
1.儀器與耗材
儀器和設備
Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀；
Auto EVA 60全自動平行濃縮儀；
高效液相色譜/質譜聯用儀 Agilent 1290+6470；
RayCureTM MCX陽離子交換柱（60mg/3ml）（貨號：RC-204-72855）
試劑和標準品
乙腈、甲酸、甲醇均為TEDIA公司色譜純試劑，乙酸銨、濃鹽酸、氨水均為西隴科學分析純試劑，水由Milli-Q超純水系統制得。
5種DU品標準品來源于某市公& 安客戶
固相萃取凈化條件
| 全自動固相萃取儀 | Fotector Plus 高通量全自動固相萃取儀 |
| 固相萃取柱 | MCX陽離子交換柱(RayCureTM, 60 mg/3 mL, 貨號：RC-204-72855) |
| 活化 | 甲醇、水 |
| 淋洗 | 水、甲醇 |
| 洗脫 | 5%氨化甲醇 |
樣品制備與富集
將污水水樣經過抽濾裝置進行過濾，準確量取50 mL于上樣管中，加入鹽酸調節pH=2左右。依次用5 mL甲醇和5 mL水分別以2 ml/min的速率活化MCX陽離子交換固相萃取柱。將樣品以2 ml/min的速度經固相萃取小柱富集后，用2 ml水清洗樣品瓶并過柱，再用4 mL甲醇淋洗固相萃取柱。將柱子擠干，然后用4 ml 5%氨化甲醇以1 ml/min的速度洗脫并收集洗脫液，固相萃取程序如圖-1所示。
將洗脫液用Auto EVA 60在40度、3 psi的條件下氮吹至近干，用200 uL水復溶，加入內標后過濾膜上LC-MS/M進行分析。
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| 圖-1 Fotector Plus 高通量全自動固相萃取儀 | 圖-2 Fotector Plus污水驗毒固相萃取方法 |
液質聯用儀器條件
| 色譜柱 | ACQUITY UPLC BEH C18 (100mm ×2.1 mm×1.7 μm ) |
| 流速 | 0.30 mL/min |
| 流動相 | A:5 mmol/L乙酸銨溶液(含0.1% 甲酸)，B:乙腈 |
| 柱溫 | 35°C |
| 進樣量 | 2 μL |
| 檢測器 | Agilent 6470 |
| 離子模式 | ESI+ |
| 吹掃氣 | 8 L/min |
| 氮氣溫度 | 330 °C |
| 簇電壓 | 3500 |
| 霧化壓力 | 45 psi |
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梯度洗脫 | 0.0-1.0 min，5-5%流動相B；1.0-2.0 min，5-15%流動相B；2.0-8.0 min，15-30%流動相B；8.0-8.5 min，30-95%流動相B；8.5-11.0 min，95-95%流動相B；11.0-12.0 min，95-5%流動相B；12.0-14.0 min，5-5%流動相B. |
液質MRM參數
| 序號 |
| 保留時間 | 母離子 | 子離子 | 碎裂電壓 | 碰撞能量 |
| 1 | 甲基苯 bing胺 | 4.2 | 150.1 | 119.1 | 80 | 8 |
| 91.1 | 80 | 20 | ||||
| 2 | ma 啡 | 4.7 | 286.2 | 165 | 150 | 40 |
| 152 | 150 | 65 | ||||
| 3 | 可dai因 | 5.6 | 300.2 | 199.2 | 110 | 16 |
| 165.3 | 110 | 24 | ||||
| 4 | 可ka因 | 9.8 | 304.2 | 182 | 120 | 16 |
| 82.1 | 120 | 32 | ||||
| 5 | 氯an酮 | 8.4 | 238.1 | 220 | 80 | 12 |
| 125 | 80 | 32 |
表1 .LC/MS/MS保留時間以及質譜參數
4.方法可行性驗證
本文建立的方法其準確性與精密度采用加標回收率與相對標準偏差(RSD)進行衡量。在空白水樣中添加濃度為0.1 μg/L的5種DU品標準品，按照上述3.2步驟進行前處理操作。實驗結果表明：5種化合物的平均回收率在73.4%~93.9%之間，RSD小于10.0%，符合分析與鑒定要求。具體數據如表-2所示。表2. 0.1μg/L加標回收率及RSD(%)(n=3)
| 化合物 | 平均回收率/% | RSD/% |
| 甲基苯 bing胺 | 80.0 | 3.2 |
| ma啡 | 93.9 | 2.6 |
| 可dai因 | 78.6 | 5.3 |
| 可ka因 | 73.4 | 8.6 |
| 氯an酮 | 76.5 | 4.7 |
5.結果與討論
由于大部分DU品都屬于弱堿性化合物，所以使用陽離子交換固相萃取柱進行凈化富集效果更好。在過柱前首先需要將水樣調成酸性以利于化合物更好地在柱子上保留，后使用堿性的氨化甲醇溶液進行洗脫。
6.總結
采用Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀對樣品進行檢測能同時進行6個樣品凈化，連續自動處理60個樣品，做樣通量高；同時可無人值守，大幅度減少了工作人員的工作量，提高了工作效率。此外還可避免工作人員因操作失誤導致的檢測偏差，也可減少實驗人員更迭對檢測結果的影響。
Auto EVA 60全自動平行濃縮儀處理通量高，60個樣品可同時進行氮吹，實驗平行性好；而且采用氮吹針自動追隨液面的設計，無需手動調節氮吹針且耗氣量小，省時省力。
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| 高通量全自動固相萃取儀 | 全自動平行濃縮儀 |
| 凈化 | 濃縮 |
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