植物過(guò)氧化物酶(POD)（檢測(cè)服務(wù)）

服務(wù)介紹：

植物過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測(cè)原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱(chēng)2-甲氧基酚)作為底物，在酶促反應(yīng)的最適條件下采用每隔一定時(shí)間測(cè)定產(chǎn)物生成量的方法，于酶標(biāo)儀470nm處測(cè)定吸光度，以吸光度變化所需酶量進(jìn)行計(jì)算，主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶活性，尤其適用于測(cè)定水果中過(guò)氧化物酶活性。

背景介紹：

過(guò)氧化物酶（POD）是一種廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)的氧化酶，具有消除過(guò)氧化氫和酚類(lèi)胺類(lèi)毒性的雙重作用。

POD是植物在逆境條件下酶促防御系統(tǒng)的關(guān)鍵酶之一，與超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)協(xié)同作用，清除體內(nèi)過(guò)剩的自由基，從而提高植物的抗逆性。

操作步驟（僅供參考）：

1、 準(zhǔn)備樣品：

①植物樣品：取0.5-1.0g植物組織或水果中層果肉加入4ml預(yù)冷的POD Lysis Buffer研磨或勻漿，4℃ 10000g離心15~20min，留取上清液，即為POD粗提液

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于過(guò)氧化物酶的測(cè)定。

③細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如有必要用POD Lysis Buffer進(jìn)行適當(dāng)勻漿，4℃ 10000g離心15~20min，留取上清液，即為POD粗提液，

④高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的過(guò)氧化物酶，可以使用POD Lysis Buffer進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、 配制POD Assay Buffer工作液：取適量的POD氧化劑和POD Assay Buffer，按POD氧化劑：POD Assay Buffer=1：14混合，

3、 POD加樣：取96孔板，按照下表設(shè)置對(duì)照孔孔、測(cè)定孔，注意：對(duì)照孔、測(cè)定孔中為同一待測(cè)樣品，但對(duì)照孔中是提前加熱煮沸5min的樣品

 4、 POD測(cè)定：立即以酶標(biāo)儀，以對(duì)照孔為對(duì)照，測(cè)定470nm處測(cè)定孔的吸光度(A測(cè)定0)；37℃準(zhǔn)確孵育3min后，立即加入5μl POD終止液終止反應(yīng)(備選方案)，以對(duì)照孔為對(duì)照，以酶標(biāo)儀測(cè)定470nm處測(cè)定孔的吸光度(A測(cè)定1)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣須知：

1.南京和上海地區(qū)的客戶(hù)可提供上門(mén)取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系

2.外地客戶(hù)可郵寄樣本，樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請(qǐng)務(wù)必提前告知

4.測(cè)試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后，樣本可以保留1個(gè)月，若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>

備注：本公司對(duì)客戶(hù)的項(xiàng)目的專(zhuān)有技術(shù)和資料（包括實(shí)驗(yàn)方案，測(cè)試結(jié)果，樣本等）負(fù)有絕對(duì)保密的責(zé)任。

僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！

植物過(guò)氧化物酶(POD)（檢測(cè)服務(wù)）