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有獎互動 | 膜層析新利器,病毒純化 So easy
?新型疫苗和疾病療法研發中的病毒、病毒樣顆粒和病毒載體純化的需求越來越多,因此需要使用更高效的純化技術。與蔗糖或氯化銫梯度離心相比,離子交換層析法具有諸多的優勢:處理量大、病毒產量、純度和感染性更高、處理時間顯著縮短等。
賽多利斯開發的 Sartobind® 離子交換膜層析技術因為具有較大孔隙可以讓目標分子通過基質進行對流運動,而不是擴散運動。這樣就可以快速捕獲目標(結合)并洗脫(解離),從而縮短循環時間。而且這種即用型膜層析的床體積更小,因而其對緩沖液的需求量也更低。產品形式上為了滿足科學家靈活多樣的需求,Vivapure 和 Sartobind® Lab 膜層析產品在設計之初就考慮到可通過離心、注射器、蠕動泵或 FPLC 系統進行驅動。
基于以上原因,加上 Sartobind® Lab 對病毒顆粒沒有物理截留作用,因此對病毒純化效果非常理想。下面讓我們了解一下Sartobind® Lab 在皰疹病毒以及濃核癥病毒純化中的應用情況:
1、使用 Sartobind® Lab S 100 純化皰疹病毒
純化條件和步驟見表1。實驗結果表明,大多數傳染性偽狂犬病病毒 Kaplan 株 (PrV-Ka)和缺乏糖蛋白 gD (PrV-gD-Pass) 、以及牛皰疹病毒1(BHV-1) 是在 MES 緩沖液中用 400 mM KCl 洗脫后發現的。且超過 85% 的病毒在單一餾分中被洗脫(表2)。

表1. PrV和BHV-1的純化條件

表2. 陽離子交換層析后PPrV和BHV-1的收率
2、使用 Sartobind® Lab 純化濃核癥病毒
陰、陽離子交換層析膜均可以用來結合病毒顆粒,具體使用哪一種要由進料 pH 決定(表3)。本實驗中Q柱有最佳的純化效果。且結果顯示,Sartobind® 沒有尺寸排除效應,這表明膜層析柱是捕獲大病毒的不錯之選。
表3.Sartobind®Lab Q、D和S的濃核癥病毒結合能力
互動有禮
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使用Sartobind® Lab Q 和S
離子交換膜層析進行病毒純化