和劍橋大學(xué)博士探索蛋白純化的未來(lái)
使用層析的方法對(duì)蛋白質(zhì)分子進(jìn)行純化進(jìn)而進(jìn)行表征是相關(guān)基礎(chǔ)與應(yīng)用研究既普遍又都不可少的操作。
傳統(tǒng)的樹(shù)脂層析柱在蛋白純化發(fā)展的進(jìn)程中發(fā)揮了巨大的作用,但也存在一些弊端,例如:
· 過(guò)程耗時(shí)、裝柱及脫氣等操作繁瑣
· 難以實(shí)現(xiàn)高通量,
· 硬件投入大 等等
為了解決這些問(wèn)題,膜層析技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。如果您對(duì)膜層析技術(shù)還沒(méi)有深入的了解,那讓我們一起通過(guò)劍橋大學(xué)解剖學(xué)系 Alan R. Johnson 博士的平行對(duì)比實(shí)驗(yàn)看看膜層析技術(shù)與傳統(tǒng)樹(shù)脂凝膠層析純化在所需時(shí)間、蛋白質(zhì)產(chǎn)量和活性及成本和設(shè)備要求幾個(gè)方面的對(duì)比。
實(shí)驗(yàn)使用DEAE陰離子交換樹(shù)脂層析柱和離心型陰離子交換膜層析Vivapure® D柱,分別用于純化可溶性軸突生長(zhǎng)抑制蛋白,該蛋白從第 7 天的雞胚晶狀體中獲得。它能夠引導(dǎo)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGC)軸突走向視神經(jīng)盤(pán),并在視神經(jīng)盤(pán)聚集成束形成視神經(jīng)。